反应五要素:
乳房链球菌PCR检测试剂盒品Pai参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是Z末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
使用及效果:
将压碎的一小片重量约在100 mg 左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
产品名称 | 规格 | 分类 |
乳房链球菌PCR检测试剂盒品Pai | 50T | PCR检测试剂盒 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(Z多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
普通PCR反应流程:
自备物品:
乳房链球菌PCR检测试剂盒品Pai15毫升锥形离心管:用于制备样品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶标板:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
酶标仪:用于微量样品比色分析
储存条件:
14℃或-20℃
准备物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
人胃细胞英文名称:SGC-7901
Littman琼脂/Littman Agar真菌的分离培养250克国产/进口
人脑成纤维细胞完全培养基100mL
察氏琼脂培养基/察氏培养基/Czapek Dox Agar用于酵母菌的培养250克国产/进口
人表角质形成细胞完全培养基100mL
抗生素Ⅳ号培养基/抗生素4号培养基/Antibiotic Agar NO.4两性霉素B等药品的效价测定250克国产/进口
大鼠食管平滑肌细胞完全培养基100mL
去氢胆酸钠/脱氢胆酸钠/3,7,12-三氧-5β-胆烷酸钠/Sodium dehydrocholateBR,95%100克国产/进口
Westrrn Blot Loading ControlsWestrrn Blot/内参阳性对照100μg100μg
胰膘肉汤基础/胰示肉汤基础/胰月示肉汤基础/Tryptose Broth Base用于肺炎链球菌、布鲁氏菌细菌的培养250克国产/进口
SC-1(小鼠胚胎细胞)5×106cells/瓶×2
乳房链球菌PCR检测试剂盒品PaiGoat anti-rat IgG whole serum 羊抗大鼠IgG抗血清 1ml
GABA Transporter 1/GAT-1 γ氨基运载蛋白1抗体 0.1ml
ANGEL2 ANGEL2蛋白抗体 0.2ml
BGP/Osteocalcin 骨保护蛋白/骨钙素抗体 0.1ml
ZSWIM3 ZSWIM3蛋白抗体 0.2ml
ADAMTSL4 整合素样金属蛋白酶与凝血酶样4蛋白抗体 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的小鼠抗人IgG 0.1ml
SSB/La 干燥症SSB/La抗体 0.2ml
PEPT2/SLC12 肠道肽转运蛋白2抗体 0.1ml
RbAp48 视网膜母细胞瘤结合蛋白P48抗体 0.2ml
ERCC6L 发育相关蛋白ERCC6L抗体(乙醇致畸因子) 0.2ml
TSPAN20/UPIb 四分子交联体20抗体(四旋蛋白) 0.2ml