KAPA HiFi mix NGS文库DNA扩ZG保真热启动聚合酶预混液

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NGS文库DNA扩ZG保真热启动聚合酶预混液

KAPA HiFi HotStart ReadyMix是一种DNA扩增预混液，包含引物和模板之外扩增完全反应必需成分。预混液所含KAPA HiFi DNA Polymerase是新型改造B族DNA聚合酶，错误率比野生型Taq DNA聚合酶低约100倍，成功率和产率比野生型B族proofreading活性的DNA聚合酶更高。适用于NGS文库。

KAPA HiFi HotStart ReadyMix高保真DNA聚合酶预混液

英文名称：KAPA HiFi HotStart ReadyMix

中文名称：KAPA HiFi高保真热启动DNA聚合酶预混液

品Pai：KAPA

用于克隆和蛋白质表达或基因组表征的DNA核酸片段的扩增，高保真PCR，新一代测序NGS文库扩增，定点突变。

聚合酶预混液DNA扩增特点

高DNA亲和力，无需辅助蛋白和DNA结合结构域

高持续合成能力

长片段扩增能力

选择失活，低非特异性扩增

KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶是一种新型B家族DNA聚合酶，经过工程改造后对DNA的亲和力增加，不需要辅助蛋白或DNA结合域。与野生型B家族DNA聚合酶相比，该酶固有的高持续合成能力可显著提高合成产量，速度和灵敏度。此外，扩增长片段以及富含GC和AT片段的能力显著提高。该酶与特有抗体结合，*次变性步骤之前可以保持失活状态。这可以防止反应过程中的非特异性扩增，提高灵敏度，并提高反应效率。

KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase is a novel B-family DNA polymerase, engineered to have increased affinity for DNA, without the need for accessory proteins or DNA binding domains. The intrinsic high processivity of the enzyme results in significant improvement in yield, speed and sensitivity when compared with wild-type B-family DNA polymerases. In addition, the ability to amplify long targets, as well as GC- and AT-rich targets, is significantly improved. The enzyme is combined with a proprietary antibody that inactivates the enzyme until the first denaturation step. This prevents nonspecific amplification during reaction setup, increases sensitivity, and improves reaction efficiency.

组份（除引物和模板的扩增反应液）

DNA聚合酶+缓冲液混合：

DNA聚合酶：0.5U /25μL反应

缓冲液：dNTPs（每种dNTP 0.3mM，1X），MgCl₂（2.5mM，1X ）和稳定剂

高保真热启动聚合酶技术参数

聚合酶种类：改造B族DNA聚合酶

聚合酶活性：KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶具有5'g3'聚合酶和3'g5'核酸外切酶（proofreading）活性，但没有5'g3'核酸外切酶活性。

扩增片段长度：可从基因组DNA中扩ZG达15kb的目标或从较不复杂的目标扩增20kb。

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶预混液设计用于各种目标和大小片段的常规高保真PCR。它的错误率比野生型Taq DNA聚合酶低约100倍，成功率和产率比野生型B家族（proofreading）DNA聚合酶更高。另外，KAPA HiFi HotStart比野生型B家族DNA聚合酶需要更短的反应时间。 KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶具有5'g3'聚合酶和3'g5'核酸外切酶（proofreading）活性，但没有5'g3'核酸外切酶活性。

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶预混液应用

KAPA HiFi热启动PCR试剂盒非常适合：

用于常规测序的PCR（直接测序或克隆PCR产物的测序）

新一代测序文库扩增（与KAPA文库扩增方案配合使用时）

扩增DNA核酸片段用于克隆和蛋白质表达或基因组表征

定点突变

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶预混液产生的DNA核酸片段可用于常规下游分析和应用，包括限制性内切酶消化，克隆和测序。KAPA HiFi高保真DNA聚合酶预混液产生的PCR产物是平端的，但可以加3'-dA-尾以克隆到TA载体中。

Quick Notes

• KAPA HiFi HotStart ReadyMix PCR Kits contain the engineered KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase –developed for fast and versatile high-fidelity PCR.

• Buffer, MgCl2 , dNTPs and enzyme are supplied in a convenient 2X ReadyMix – just add primers and template.

• KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase has the lowest published error rate of all B-family DNA polymerases (1 error per 3.6 x 106  nucleotides incorporated).

• Amplify targets up to 15 kb from genomic DNA or 20 kb from less complex targets.

• Denature at 98°C for 20 sec per cycle.

• Optimal annealing temperatures are typically higher than in other PCR buffer systems. Use an annealing temperature gradient to determine the optimal annealing temperature.

• To ensure the highest fidelity, use high quality DNA and the lowest possible number of cycles.

KAPA Biosystems是一家美国知名生物公司，成立于2006年，其生产基地位于南非开普敦。KAPA Biosystems致力于研发、生产下一代PCR（Next-Generation PCR）所需的生物酶。目前其分子进化平台开发的产品已被广泛应用于DNA扩增、二代测序、分子诊断等领域。

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶预混液订购信息

KK2600（） KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 0.25 mL

KK2601（） KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 1.25 mL

KK2602（ ）KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 6.25 mL

* Contains 2.5 mM MgCl₂ at 1X

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