细胞培养试剂人或各种动物血液及干细胞分离液
规格:200ml
保存:18℃-25℃避光保存,有效期 2 年。
本品为带有乳光或微乳光的灭菌水溶液。主要成分是 Ficoll 400 与泛影酸葡甲胺。适用于从各种动物血液及中分离干细胞,在YL和医学生物学研究中广泛应用。其他人及动物多种比重细胞分离液。注:因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同,所以用户在定制分离液时应提供所需分离液的比重、动物的种属及被分离细胞的名称。
一、分离方法说明及图例
A.Ⅰ. 取新鲜抗凝血液或脐带血与淀粉 550 按 1:1 比例混合, 37℃反应 5-10 分钟(5ml 以下样本反应 5 分钟,5ml 以上样本反应 10 分钟) ;取新鲜抗凝,加入一份细胞洗涤液,混匀后以 400g(约 1500 转/分)离心 5 分钟,弃去上清。沉淀与淀粉 550 按 1:1 比例混合,37℃反应 5-10 分钟(5ml 以下样本反应 5 分钟,5ml 以上样本反 应 10 分钟) ;
B. 加入为步骤 A 中所得混合液 1/2 体积的全血及组织稀释液混匀 20℃-30℃自然沉降 20-30 分钟,吸取上清 吸取上清备用;
C. 向步骤 B 中所得上清液中加入为其一倍以上体积的细胞洗涤液混匀,以 500g(约 1800 转/分)离心15 分钟(半径 15cm 水平转子) ,弃去上清保留沉淀细胞;
D. 向细胞沉淀中加入全血及组织稀释液调整细胞浓度为 2×10 8 —1×10 9 个/ml,小心叠加于细胞分离液之液面上(混合液:分离液=2:1) ;
E. 以 400g(约 1500 转/分)离心 20 分钟(半径 15cm 水平转子) ;
此时离心管中由上至下细胞分四层。*层;为稀释液层。第二层;为环状乳白色含所需干细胞层。第三层;为透明分离液层。第四层;为极少红细胞层。收集第二层细胞放入为其5-10倍体积的细胞洗涤液中,充分混匀后,以500g(约1800 转/分)离心15分钟。沉淀经反复洗涤2 次即得所需干细胞。
F. 为获得纯度更高的干细胞,在步骤 E 中离心完成后可吸取第二层干细胞层再与淀粉 550按 1:1比例混匀,20℃-30℃自然沉降 20-30 分钟,收集上清加入细胞洗涤液 500g(约 1800 转/分)离心 15 分钟。沉淀经反复洗涤 2 次既得较高纯度干细胞。(用户可根据实际需要重复此操作步骤)
注:本方法提取率大于 80%,所提细胞不分化不转化,对人体无害,可用于生物ZL、细胞培养及分子生物学实验等。
分离图例:
二、 注意事项
A. 本分离液是敏光型的, 在运输和贮藏过程中应在18℃-25℃避光保存, 启封后置4℃保存避免微生物污染。另外,本品为真空包装,未启封前置于10℃ 以下易出现白色结晶,影响分离效果。
B.待分离的样本要求新鲜,避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一定在20℃水浴箱中复温20 分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果好,且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。
C.由于各品Pai离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数,调节离心的时间,摸索的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。
D.好使用无静电反应的离心管,推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。
E.优抗凝剂选择:EDTA、枸橼酸、肝素。注意在血液稀释过程中去除抗凝剂体积。
F.分离过程中所用其他试剂如:淀粉550、全血及组织稀释液、细胞洗涤液及红细胞裂解液等以我公司产品为优选择,本公司相关系列产品无菌、无病毒、无支原体、低内毒素水平且无细胞毒性,所获得的细胞可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。
三、产品性能指标
pH 7.0-7.5
渗透压 280-340mOsmol/kg
内毒素 ≤0.5EU/ml
无菌 直接接种培养14 天后培养基澄清
澄明度及不溶性颗粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下
四、贮藏及保存期限
18℃-25℃避光保存,有效期两年。启封后置4℃保存,有效期一周。
注:若保证无微生物污染,启封后可置4℃长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易
出现白色结晶,影响分离效果。
细胞培养试剂人或各种动物血液及干细胞分离液订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。
运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速GX的快递保证产品快速送达您的手中。