HPDE6-C7人正常导管上皮细胞系 专业技术指导 专注复苏
FL62891细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
STC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Mv 1Lu(NBL-7)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好Z至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净ZDT里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
OKa-C-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SACC-LM细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
RBE细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂),英文名:Pfizer Enterococcus Selective Agar,用途:用于粪链球菌选择性分离
梭状芽孢杆菌计数琼脂,英文名:Clostridia Count Agar,用途:用于梭状芽孢杆菌计数
改良桑塔基氏培养基基础(含2.5%NaCl),英文名:Starkey,s Medium Base, Modified with 2.5% NaCl,用途:用于脱肠菌属和脱弧菌的培养,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
梭菌增菌培养基,英文名:Clostridium Enrichment Medium,用途:用于梭菌的增菌培养
细胞形态特性:详见细胞说明书
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBDA),英文名:Violet Red Bile Dextrose Agar,用途:肠道菌计数琼脂,不含乳糖,用于肠道菌分离和计数
厌氧卵黄琼脂基础,英文名:Anaerobic Egg Yolk Agar Base,用途:用于肉毒梭菌增菌分离,每100ml培养基中添加3支50%卵黄盐水悬液
KMS26细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H187[H187]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
QGY-7703细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
人锡蛋白(SNN)ELISA试剂盒,英文名:Human SNN ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1beta)ELISA试剂盒,英文名:Mouse SDF-1beta ELISA Kit,规格:48T/96T
改良盐缓冲液,英文名:Modified Phosphate Saline Buffer,用途:用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
细胞背景资料:详见相关文献介绍
冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
双歧杆菌BS培养基,英文名:Bifidobacterium BS Medium,用途:用于双歧杆菌的分离培养
MRS培养基(不含葡萄糖),英文名:MRS Medium without Glucose,用途:用于乳酸菌的培养
化镁孔雀绿增菌液(RV/MM),英文名:Rappaport-Vassiliadis Medium,用途:用于沙门氏菌选择性增菌
硅酸盐细菌培养基,英文名:Silicate Bacteria Medium,用途:含琼脂,用于硅酸盐细菌的培养
NCI-H1792细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:3-1:8传代。
UMR-106细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MHCC97-H细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
COLO-824细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
OV-90细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
COLO320HSR细胞专业复苏;细胞生长特性:半贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
人外生骨疣样蛋白1(EXTL1)ELISA试剂盒,英文名:Human EXTL1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人IgG-Fc片段受体Ⅱ(FcγRⅡ)ELISA试剂盒,英文名:Human FcγRⅡ ELISA Kit,规格:48T/96T
人胍基丁胺脲水解酶(AGMAT)ELISA试剂盒,英文名:Human AGMAT ELISA Kit,规格:48T/96T
厌氧菌肉汤MIC,英文名:Anaerobe Broth MIC,用途:用于肉汤微量稀释法测定厌氧菌敏感性养和厌氧菌培养
胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA),英文名:Soybean-Casein Digest Agar,用途:用于YJ剂效力检查(ZG药典2010)
支原体培养基基础,英文名:Mycoplasma Medium Base,用途:需添加马血清、MEM 培养液、青霉素
293(HEK-293,HEK293)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
CCK-81细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SNU-C2B细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠白三烯B4(LTB)ELISA试剂盒,英文名:LTB ELISA Kit,规格:48T/96T
人斯素2(STC2)ELISA试剂盒,英文名:Human STC2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人顺乌头酸酶1(ACO1)ELISA试剂盒,英文名:Human ACO1 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠β-葡萄糖苷酸酶(GUSb)ELISA试剂盒,英文名:GUSb ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
大鼠白三烯B4(LTB)ELISA试剂盒,英文名:LTB ELISA Kit,规格:48T/96T
改良Y培养基,英文名:Modified Y Medium,用途:用于小肠结肠炎耶尔森氏菌分离
溶菌酶多粘菌素琼脂基础,英文名:Lysozyme Polymyxin Agar Base,用途:用于炭疽杆菌分离培养, 每100ml添加多粘菌素B溶液、0.1%溶菌酶溶液各1支
蛋白胨山梨醇胆盐(PSB)肉汤,英文名:Peptone Sorbitol Bile salts Broth,用途:用于耶尔森氏菌选择性增菌
庖肉培养基基础,英文名:Cooked Meat Medium Base,用途:含9.8%牛心浸粉,用于厌氧菌的培养,需添加适量庖肉牛肉粒
Stuart运送培养基,英文名:Stuart Transport Medium,用途:用于致病菌标本的采集、运输和保存
Hep-3B2.1-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Farage细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
T24细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
KOSC-2 cl3-43细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:2.2 x 10^4 cells/ml
沙氏液体培养基(含霉素),英文名:Sabouraud’s Broth with Chloramphenicol,用途:用于真菌增菌培养
HCC 94细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
KYSE410细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:5传代
hEM1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
接收细胞相关问题:如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜,血清发货的细胞在室温下静置1-2天(注意不要放冰箱),干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,请即刻复苏细胞。T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。
SNU-354细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代