MV-4-11慢性单核细胞性白血病细胞系 传代很慢要怎么操作

MV-4-11慢性单核细胞性白血病细胞系 传代很慢要怎么操作
Hs68细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MUGal肉汤基础，英文名：MUGal Broth Base，用途：用于大肠菌群快速检测。每100ml中添加0.5mg头孢磺啶
VRE琼脂基础，英文名：VRE Agar Base，用途：每升培养基添加1mg美罗培南和6mg万古霉素制成VRE′S
Rogosa SL肉汤，英文名：Rogosa SL Broth，用途：用于口腔、阴道和粪便中乳酸杆菌的检验，每升添加1.32ml冰乙酸和1ml吐温80
细胞培养无菌操作步骤和注意事项：1.打开无菌工作台及净化室的紫外灯，消毒半小时以上。2.进入净化室前先关闭紫外灯，打开超净台风机，等待30min以上，以排尽臭氧。3.穿好隔离衣，戴好口罩，帽子。4.风淋2分钟。5.0.1%水泡手，擦干。6.点燃酒精灯;超净台内应避免放入过多的物品;使用的吸管，滴管，试管，培养瓶等均事先灭菌。7.打开各类瓶盖前先过火，以固定灰尘;打开的瓶口、试管口过火焰，镊子使用前应经火焰烧灼。8.水平式风机的超净台，应使瓶口斜置，应尽量避免瓶口敞开直立。9.同一根吸管或滴管不应连续用于几个不同的细胞系；吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。10.漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。11.操作完毕后恢复工作台面。
细胞背景资料：详见相关文献介绍
乳糖蛋白胨培养液，英文名：Lactose Peptone Broth，用途：用于水中总大肠菌群的测定
WL营养肉汤，英文名：Wallerstein Laboratory Nutrient Broth，用途：用于啤酒和发酵产品中酵母菌和细菌的培养
改良巴尔斯氏培养基基础(含2.5%NaCl)，英文名：Baar,s Medium for Sulfate Reducers, Modified with，用途：用于脱肠球菌等盐还原细菌的培养，每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
亮绿红琼脂/红煌绿琼脂，英文名：Brilliant Green Phenol Red Agar，用途：用于沙门氏菌选择性分离
IMR-90细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
H-4-11-E细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WK256细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人白细胞分化抗原CD4(CD4)ELISA试剂盒，英文名：Human CD4 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠15脂加氧酶(15-LO)ELISA试剂盒，英文名：15-LO ELISA Kit，规格：48T/96T
人锌结合α2-糖蛋白1(αZGP1)ELISA试剂盒，英文名：Human αZGP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人跨膜蛋白2样蛋白(TMEM2L)ELISA试剂盒，英文名：Human TMEM2L ELISA Kit，规格：48T/96T
M9低盐培养基(5倍浓缩)，英文名：M9 Minimal Salt,5×，用途：用于制备M9低盐培养基,培养重组大肠杆菌菌株
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
MEB肉汤，英文名：MEB Broth，用途：用于真菌杀灭试验
如何进行细胞复苏：1)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入37℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；2)从37℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加10倍以上培养液，混匀；3)离心，1000rpm，5min；4)弃去上清液，加入含10%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养；5)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但Z好为对数生长期细胞。在冻存前一天Z好换一次培养液；2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；3)冻存和复苏Z好用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放37度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
SUM102PT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW620[SW-620]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EC-GI-10细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
hTERT-HPNE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KP-4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H1417细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前1d换液；2)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度，离心，去上清；3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；4)分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液；5)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；6)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃/min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管；2)迅速放入36℃～37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成；3)冻存管用70％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加10ml培养液；4)低速离心(500～1000r/min) 5min，去上清后再用培养液洗一次；5)用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到10(7)/ml，在融后稀释20倍时，仍能保持5×10(5)/ml数量。
细胞传代方法：每周2-3次。
COLO205细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
HLEB3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HIPEpiC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TE3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Bolton肉汤基础，英文名：Bolton Broth Base，用途：用于弯曲菌选择性增菌,每100ml添加1支Bolton肉汤基础添加剂和5ml Bolton肉汤基础添加剂
改良爱德华培养基基础，英文名：Edwards Medium Base,Modified，用途：用于无乳链球菌的选择性分离,每升添加5～7%无菌脱纤维绵羊全血
GYCA培养基，英文名：Glucose Yeast extract Calcium carbonate Medium，用途：用于甘蔗流胶病菌检验
BAT肉汤，英文名：BAT Broth，用途：用于脂环酸芽孢秆菌检验
MD培养基，英文名：Minimal Dextrase Medium，用途：用于酵母菌的筛选
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
SHZ-88细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SSP-25细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2291[H2291]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
哥伦比亚琼脂培养基基础，英文名：Columbia Agar Base，用途：用于梭菌检验,每100ml添加1支庆大霉素
M9低盐培养基(5倍浓缩)，英文名：M9 Minimal Salt,5×，用途：用于制备M9低盐培养基,培养重组大肠杆菌菌株
改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)/(mTSB+N基础)，英文名：mTSB Broth with Novobiocin Base，用途：用于O157菌选择性增菌,每225ml中添加1支新生霉素储备液组成含新生霉素的改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB+N)
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
RS琼脂，英文名：Rimler-Shotts Agar，用途：用于致病性嗜水气单胞菌的分离
小鼠脊髓灰质炎病毒受体相关蛋白3(PVRL3)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PVRL3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠蛋白激酶N1(PKN1)ELISA试剂盒，英文名：PKN1 ELISA Kit，规格：48T/96T
Dubos油酸琼脂基础，英文名：Dubos Oleic Agar Base，用途：用于肺结核杆菌的分离培养,每90ml添加5支Dubos油酸琼脂基础添加剂和1-2支青霉素溶液
细胞生长特性：悬浮生长
细胞形态特性：成淋巴细胞
卵黄化钠琼脂培养基基础，英文名：Egg Yolk Salt Agar Medium Base，用途：用于金黄色葡萄球菌选择性分离,每65ml添加2支10%化钠卵黄液
NE-4C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BC-020细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
C8-D1A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠白三烯B4(LT-B4)ELISA试剂盒，英文名：LT-B4 ELISA Kit，规格：48T/96T
人C-肽(C-P)ELISA试剂盒，英文名：Human C-P ELISA Kit，规格：48T/96T