HPDE正常导管上皮细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料:详见相关文献介绍
U27KM细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BC-022细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MV-1-Lu细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Hs 675.T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代,每周2-3次。
如何进行细胞复苏:1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化;2)从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3)离心,1000rpm,5min;4)弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;5)次日更换一次培养液,继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但Z好为对数生长期细胞。在冻存前一天Z好换一次培养液;2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作(戴棉手套),以免冻伤;3)冻存和复苏Z好用新配制的培养液。细胞复苏的时候,有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后,放在室温下,经常发生冻存管爆炸,该怎么避免出现这种情况吗?其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的?一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口,再稍拧松盖子,再放37度水浴锅中摇溶,在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中,迅速离心,再用培养基洗一遍。
PAEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HTR-8细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
TB 1 LU细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MHCC97-L细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
293 Cells,low passage细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
T6-Swiss albino细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HLEB3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CPA 47细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MA104细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
mESCs-11细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
ECA109细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SH-SY5Y细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
细胞传代方法:1:2传代
复壮稀释液(MRD),英文名:Maximum Recovery Diluent,用途:——用于细菌的复壮稀释
改良罗氏培养基基础,英文名:Lowenstein-Jensen Medium Base, Modified,用途:不含天冬酰胺,含谷酸钠,用于结核杆菌检验,添加PNB制成PNB培养基,添加TCH制成TCH培养基
酵母粉葡萄糖霉素琼脂(YGC),英文名:Yeast Extract Glucose Chloramphenicol Agar,用途:用于霉菌酵母菌的分离和计数
马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基(不含霉素),英文名:Potato Dextrose Agar Medium(PDA),用途:用于霉菌和酵母菌计数
改良EC肉汤(mEC+n)基础,英文名:Modified EC Broth Base,用途:用于O157选择性增菌,每225ml中添加1支新生霉素储备液,每100ml中添加1支新生霉素储备液
HE琼脂培养基,英文名:Hektoen Enteric Agar Medium,用途:用于肠道菌选择性分离(符合美国药典USP)
FHL124细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCL13细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HAEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HVT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
Hurt-78细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RAEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H2122细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:3-1:4传代;每周换液2-3次。
HONE1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞复苏基本方法:1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时,处理方式为:在寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask均加满培养基。请检查flask外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C,5%CO2培养箱中,使细胞回温至37°C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml培养基于flask内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
Mahlavu细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人酸酯酶2(SULF2)ELISA试剂盒,英文名:Human SULF2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人假尿苷酸合酶7(PUS7)ELISA试剂盒,英文名:Human PUS7 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠磷蛋白关联鞘糖脂微区2(PAG2)ELISA试剂盒,英文名:PAG2 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠白介素17B(IL17B)ELISA试剂盒,英文名:IL17B ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠蛋白激酶1(PKIN1)ELISA试剂盒,英文名:PKIN1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠促泌素(SCGN)ELISA试剂盒,英文名:Mouse SCGN ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA试剂盒,英文名:AC-1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠亮酸丰富重复LGI家族成员3(LGI3)ELISA试剂盒,英文名:Mouse LGI3 ELISA Kit,规格:48T/96T
人丝切蛋白1(CFL1)ELISA试剂盒,英文名:Human CFL1 ELISA Kit,规格:48T/96T
DEV乳糖蛋白胨肉汤,英文名:DEV Lactose Peptone Broth,用途:用于大肠杆菌的测定
酵母碳源基础(YCB),英文名:Yeast Carbon Base,用途:用于通过氮源的利用对酵母菌进行分类
肠球菌推定肉汤(EP肉汤),英文名:Enterococci Presumptive Broth,用途:——用于水中肠球菌的分离和鉴定
MS维生素,英文名:Murashige & Skoog Vitamins,用途:用于植物组织培养
COLO829细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
L1210细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
MCF7[MCF-7]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁生长
Middle Brook 7H11琼脂基础/改良Middle Brook 7H11琼脂基础,英文名:Middle Brook 7H11 Agar /Mitchison Modifi 7H11 Agar,用途:用于分枝杆菌分离培养,每180ml添加1支甘油和4支Middlebrook OADC增菌液
改良罗氏培养基基础,英文名:Lowenstein-Jensen Medium Base, Modified,用途:不含天冬酰胺,含谷酸钠,用于结核杆菌检验,添加PNB制成PNB培养基,添加TCH制成TCH培养基
麦康凯琼脂基础,英文名:MacConkey Agar Base,用途:不含碳水化合物,用于大肠杆菌的发酵研究
B5培养基,英文名:B5 Medium,用途:含蔗糖20g/L,适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
GC肉汤基础,英文名:GC Broth Base,用途:用于致病性奈瑟氏菌的分离培养,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-NYJ剂(VCN)、无菌血红蛋白各1支
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性:详见细胞说明书
DAMI细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮为主,少量贴壁;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
ND7/23细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人二肽基肽酶IV(DPP4)ELISA试剂盒,英文名:Human DPP4 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠乙醇脱酶1(ADH1)ELISA试剂盒,英文名:ADH1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MIP-5 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠精子特异性抗原2(SSFA2)ELISA试剂盒,英文名:SSFA2 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse FDP ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次Z多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
麦氏(Meclary)琼脂,英文名:Meclary Agar,用途:用于真菌培养
Slantz and Bartley 培养基,英文名:Slantz and Bartley medium,用途:用于肠球菌、粪链球菌的分离和培养
SLB培养基,英文名:Saline Lactose Broth Medium,用途:用于CJ过滤器的细菌截留验证
肉浸液肉汤,英文名:Meat Infusion Broth,用途:用于蜡样芽胞杆菌的纯培养
7.5%化钠肉汤,英文名:7.5%Sodium Chloride Broth,用途:——用于微生态活菌制品中金黄色葡萄球菌的检测