C28/I2细胞:人正常软骨细胞系 复苏培养细胞ZX
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
C28/I2细胞:人正常软骨细胞系 复苏培养细胞ZX
细胞生长特性:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性:详见细胞说明书
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理;霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
C28/I2细胞:人正常软骨细胞系 复苏培养细胞ZX
细胞背景资料:软骨;SV40转化;女性
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸氢跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来美国以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
C28/I2细胞:人正常软骨细胞系 复苏培养细胞ZX
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NUTU-19细胞系(大鼠卵巢癌细胞冷藏平台)
NCI-H2170[H2170]细胞系(人肺鳞状细胞冷藏平台)
WIL2-S[WIL2S]细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
Methanol-d4
4-AMino-3-hydroxybenzoic acid
N-[(9-Ethylcarbazol-3-yl)Methylene]-2-Methyl-1-indolinylaMine
4-Chloro-2-hydroxybenzonitrile
2,4-DibroMothiophene, 96%
HRPTEpiC细胞系(人肾小管上皮细胞冷藏平台)
SF763细胞系(人脑瘤细胞冷藏平台)
HCC 94(HCC941122)细胞系(人子宫鳞癌细胞冷藏平台)
U-937细胞系(人淋巴瘤细胞冷藏平台)
BEL-7404细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
HeLa 229细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
HLMVEC细胞系(人肺微血管内皮细胞冷藏平台)
5-BROMOPYRIMIDIN-4-AMINE
carbonic anhydrase from bovine erythro-cytes
Toluene-d8
phenyl bromoacetate
Isopropylboronic acid
DMS153细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
CT26细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
LS-174T细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
M059J细胞系(人神经胶质瘤细胞冷藏平台)
HEEC细胞系(人正常食管上皮细胞冷藏平台)
MC3T3-L1细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
NCI-H1568细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
LS174T细胞系(人结肠癌肿瘤细胞冷藏平台)
NCI-H660细胞系(人前列腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1869细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
B104细胞系(大鼠神经母细胞冷藏平台)
Benzyl (S)-(-)-Tetrahydro-5-Oxo-3-FuranylcarbaMate
6-Fluoro-1-indanone, 97%
2,3,4,5-Tetrafluorobenzyl broMide, 97%
PotassiuM hydroxide
Diethyl Chlorooxalacetate
WEHI164细胞系(小鼠纤维肉瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1435[H1435]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
PC9细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
ST486细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
3T3TK细胞系(小鼠成纤维细胞冷藏平台)
SK-HEP-1细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
5,5'-DibroMo-2,2'-bipyridyl
2,6-DiforMyl-3,5-diMethoxyphenol
TetraethylaMMoniuM p-toluenesulfonate, 98%
1,3-BUTADIENE
2-Ethoxyethyl Cyanoacetate
HCC70细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
PtK1(NBL-3)细胞系(袋鼠肾细胞冷藏平台)
BE(2)-M17细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
NS2OY细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台)
H1299细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
RIN-m5F细胞系(大鼠胰岛β细胞冷藏平台)
A549细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MCA38细胞系(小鼠结肠癌细胞冷藏平台)
QG-56细胞系(人肺扁平上皮癌细胞冷藏平台)
B16F1细胞系(小鼠黑色素瘤细胞冷藏平台)
NUGC3细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
NCI-H524[H524]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MGECs细胞系(小鼠肾小球内皮细胞冷藏平台)
SUP-M2细胞系(人间变性大细胞冷藏平台)
MOLP-2细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
MLE-12细胞系(小鼠肺上皮细胞冷藏平台)
HBdSMC细胞系(人膀胱平滑肌细胞冷藏平台)
3,6-Dihydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid, disodium salt
2,4-Hexadienyl acetate
5-Fluorotryptamine
EDN1 ELISA Kit
BRL细胞系(大鼠肝细胞冷藏平台)
NCI-H1703[H1703]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1650[H-1650,H1650]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
Ramos(RA 1)细胞系(人B淋巴细胞冷藏平台)
HCT-15细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
4-(Trifluoroacetyl)benzoic acid 97+%
2,4-Dichloropyrimidine-5-carboxylic acid
2-Chloro-6-fluorotoluene, 97%
Boc-3-amino-4-chlorobenzoic acid
4-Amidinophenylmethanesulfonyl fluoride hydrochloride
Neuro-2a[N2a]细胞系(小鼠脑神经瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1693[H1693]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1954细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
L-cell细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台)
G-292细胞系(人骨肉瘤细胞冷藏平台)
PG-LH7细胞系(人肺癌低转移细胞冷藏平台)
A20细胞系(小鼠B淋巴瘤细胞冷藏平台)
Cit ELISA Kit
Human insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA Kit
Human NGF ELISA Kit
Lp-PL-A2 ELISA Kit
ALCAM ELISA Kit
PROG ELISA Kit
Human PAOX ELISA Kit
Human insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA Kit
G401细胞系(人肾癌Wilms细胞冷藏平台)
CHP-212细胞系(人脑神经母细胞冷藏平台)
RSMC细胞系(大鼠主动脉平滑肌细胞冷藏平台)
L-MTK细胞系(小鼠胸腺激酶缺陷细胞冷藏平台)
MIN-6细胞系(小鼠胰岛素瘤细胞冷藏平台)
Mouse podocyte细胞系(小鼠肾足细胞冷藏平台)
CHO-K1细胞系(仓鼠卵巢细胞冷藏平台)
HUVEC-12细胞系(人脐静脉内皮细胞冷藏平台)
MA-104细胞系(罗猴胎肾细胞冷藏平台)
SU-DHL-5细胞系(人弥漫大D细胞冷藏平台)
benzyl 4-(bromomethyl)tetrahydro-1(2H)-pyridinecarboxylate
2-Chloro-6-methyl-3-quinolinecarbaldehyde
4-(2-bromoethoxy)benzaldehyde
DHEA ELISA Kit
NIE-115细胞系(小鼠神经母细胞冷藏平台)
HCT-8(HRT-18)细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
NCI-H1694[H1694]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
SW48细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
HB611细胞系(人肝母细胞冷藏平台)
2-ForMylbenzeneboronic acid
3-Chlorothiophene-2-carboxamide ,99%
Deoxycholic acid, 98.5-101%
Uridine 5′-diphospho-N-acetylglucosamine sodium salt ,98%
Boc-L-citrulline
SNU-475细胞系(人肝癌细胞冷藏平台)
COLO 320DM细胞系(人结直肠腺癌细胞冷藏平台)
UACC893细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
HS578T细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
T-47D细胞系(人乳腺管癌细胞冷藏平台)
UMC-11细胞系(人肺良性肿瘤细胞冷藏平台)
U251细胞系(人神经胶质细胞冷藏平台)
COL6 ELISA Kit
APOE ELISA Kit
Human DEFβ124 ELISA Kit
Chicken Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit
Rat HRAS (V-Ha-Ras Harvey Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog) ELISA Kit
Chicken Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit
Human LAT1 ELISA Kit
ANGPTL1 ELISA Kit
RSC96细胞系(大鼠雪旺细胞冷藏平台)
Malmc细胞系(人皮肤纤维微细胞冷藏平台)
NCI-H1666[H-1666,H1666]细胞系(人肺支气管癌细胞冷藏平台)
NCI-H2195[H2195]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
PT-67细胞系(小鼠逆转录病毒包装细胞冷藏平台)
L Wnt-3A细胞系(小鼠皮下结缔组织细胞冷藏平台)
SK-BR-3[SKBR-3,SKBR3]细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
(1S,2S)-(+)-N-(4-Toluenesulfonyl)-1,2-diphenylethylenediaMine
N,N-DiMethylMethyleneiMiniuM iodide
Ethyl 6-Methyl-2-oxo-3-cyclohexene-1-carboxylate (Mixture of isoMers)
3-AMino-6-Methylpyridin-2-ol
PotassiuM 4-chlorophenyltrifluoroborate, 97%
FC33细胞系(人胚肾细胞冷藏平台)
MEC-1细胞系(人粘液表皮样癌细胞冷藏平台)
SK-UT-1细胞系(人子宫平滑肌瘤细胞冷藏平台)
HLEC细胞系(人淋巴内皮细胞冷藏平台)
C2C12细胞系(小鼠成肌细胞冷藏平台)
C2C12细胞系(小鼠成肌细胞冷藏平台)
HCC-2279细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
1,3-Bis(chloromethyl)-1,1,3,3-tetramethyldisiloxane
Deflazacort
Cyclobutanecarboxylic acid
2,5-dimethylindole
Di-tert-Butyl malonate
EBC-1细胞系(人肺癌鳞癌细胞冷藏平台)
WEHI 164细胞系(小鼠纤维肉瘤细胞冷藏平台)
HO8910PM细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
TE354T细胞系(人皮肤基底细胞冷藏平台)
DMS153[DMS153]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
OCUM-1细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
3T6-Swiss albino细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
SGC-7901细胞系(人胃腺癌细胞冷藏平台)
L-363细胞系(人多发性瘤细胞冷藏平台)
RH-30细胞系(人横纹肌肉瘤细胞冷藏平台)
MCF-10A细胞系(人乳腺上皮细胞冷藏平台)
Diethyl(DiphenylMethyl) Phosphate
2-Fluorophenylzinc iodide, 0.5M in THF, packaged under Argon in resealable CheMSeal^t bottles
2-AMino-6-chlorobenzonitrile, 98%
Ginkgolic Acid (C13:0)
Cobalt sulfaMate hydrate
MEL526细胞系(人黑色素瘤细胞冷藏平台)
GDM-1细胞系(人急性粒细胞冷藏平台)
G401细胞系(人肾癌Wilms细胞冷藏平台)
SNU-620细胞系(人胃癌细胞冷藏平台)
NCI-H146细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
HeLa-S3细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)
3-(N,N-DiethylaMinocarbonyl)phenylboronic acid, pinacol ester
Corn oil
3-Fluoro-4-Methylphenylboronic acid, 97%
(Ethylenedithio)diacetic Acid
Ethyl 4-Methyl-2-pyrrolecarboxylate
BALB/3T3clone A31细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
3T3D细胞系(人瘤细胞冷藏平台)
UMC-11细胞系(人肺良性肿瘤细胞冷藏平台)
3AO细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
CAL-51细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
AKR细胞系(小鼠食管癌细胞冷藏平台)
OVCAR8细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
A253细胞系(人唾液腺肿瘤细胞冷藏平台)
NCI-H1755[H1755]细胞系(人肺癌细胞冷藏平台)
MCF7[MCF-7]细胞系(人乳腺癌细胞冷藏平台)
SNG-M细胞系(人子宫内膜癌细胞冷藏平台)
SK-MEL-3细胞系(人恶性黑色素瘤细胞冷藏平台)
K-562细胞系(人慢性髓原白血病细胞冷藏平台)
HTB-9细胞系(人膀胱癌细胞冷藏平台)
KU812细胞系(人外周血嗜碱性白血病细胞冷藏平台)
CRL细胞系(人癌细胞冷藏平台)
CHP-126细胞系(人成神经细胞冷藏平台)
2-chloro-5-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)aniline
Azasetron
Bis(pentamethylcyclopentadienyl)cobalticinium hexafluorophosphate
ECP ELISA Kit
JurkatE6-1细胞系(人急性T淋巴细胞冷藏平台)
HCC1187细胞系(人乳腺导管癌细胞冷藏平台)
SW 1088[SW-1088,SW1088]细胞系(人脑星型胶质瘤细胞冷藏平台)
D283med细胞系(人脑髓母细胞冷藏平台)
FDC-P1细胞系(小鼠细胞冷藏平台)
N-Methyl 3-BroMo-5-MethylbenzenesulfonaMide
Cytosine ,99%
3-Chloropyridine-4-carboxylic acid
1-Benzyloxy-3-methyl-2-nitrobenzene
1,3-Dimethyl-2-(2-furyl)imidazolidine
SKNO-1细胞系(人急性髓系白血病细胞冷藏平台)
HUVEC-12细胞系(人脐静脉内皮细胞冷藏平台)
BCECs细胞系(小鼠脑微血管内皮细胞冷藏平台)
PT67细胞系(小鼠逆转录病毒包装细胞冷藏平台)
RKO细胞系(人结肠腺癌细胞冷藏平台)
H08910细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
LAN-1细胞系(人神经母细胞冷藏平台)
PAP ELISA Kit
AT1R ELISA Kit
FOXO3 ELISA Kit
LPL ELISA Kit
CTX-Ⅰ ELISA Kit
ILK-1 ELISA Kit
Human MDA ELISA Kit
Human SEMA4F ELISA Kit
CP70细胞系(人卵巢癌细胞冷藏平台)
cos1细胞系(非洲绿猴肾细胞冷藏平台)
PA12细胞系(小鼠胚胎成纤维细胞冷藏平台)
HeLa229细胞系(人宫颈癌细胞冷藏平台)