超敏ECL化学发光试剂盒SM-ECL Ultra®
货号:Cat.No-P10100 SM-ECL Ultra Reagent A /B 60ml/60ml
货号:Cat.No-P10200 SM-ECL Ultra Reagent A /B 125ml/125ml
货号:Cat.No-P10300 SM-ECL Ultra Reagent A /B 250ml/250ml
SM-ECL Ultra®是我司研发的超敏ECL(Enhanced Chemiluminescent)化学发光试剂,用于检测HRP(辣根过氧化物酶)标记的目的条带,检测灵敏度可达飞克(fg)级。SM-ECL Ultra优化了底物的成分,应用了新型的Enhancer和氧化剂,发光强度更高,稳定性更好,不含有毒试剂,安全性更高。
- 高灵敏度:可达飞克级别,10-15g
- 安全性高:试剂不含对人体健康有毒的化学物质
- 信号持续时间长:发光时间长达30分钟以上
- 稳定性高:4℃保存长达一年以上,室温运输稳定性好
- 经济节约:较同类进口试剂花费更少,所需抗体少,抗体稀释度高
1. 准备工作稀释液,将SM-ECL Ultra Luminol/Enhancer Reagent (A) 和 SM-ECL Ultra Stabilized Peroxide Reagent (B) 按体积比例1:1混合
注:为了获得效果,使用前准备稀释液并立即使用。吸取SM-ECL Ultra 不同组份时要换移液管,以免污染试剂。
2. 从TBST或PBST缓冲液的托盘中取出膜,小心移去膜上的多余缓冲液,但不要让膜干燥。
3. 将膜上有蛋白的一面朝上平整地铺在一张纸板上,加上配好的工作稀释液。用量以覆 盖膜为基准,1ml工作液可以覆盖大约10cm2的膜。
4. 将膜与工作稀释液孵育1-5min,以确保整个表面覆盖。
5. 通过放射自显影胶片或成像设备获取信号。对于一个未知的信号,可调节不同曝光的 时间来获得结果。
室温保存。
问题
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可能原因
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建议
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高膜背景
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高浓度的抗体
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进一步稀释一抗和二抗,优化抗体稀释度
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低效的阻断
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增加Tween-20 的TBST缓冲液,增加脱脂奶粉阻断缓冲液浓度
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洗涤不充分
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增加洗涤液体积,或者多增加洗涤次数和时间
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一抗的质量
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抗体自身的质量问题,或重新稀释新的一抗。
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缓冲液污染
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检测缓冲液颗粒或细菌不纯物,或更换旧的缓冲液
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不规则的黑点
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膜上含有气泡
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轻轻将气泡移除
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被污染的设备
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蛋白质或残留的凝胶块可能会粘到膜上,抗体被困在其中,因洗涤不佳,造成局部信号
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样品与膜相互作用
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始终用干净的塑料托盘,避免任何类型的交叉污染
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