StarScriptDY链cDNA合成试剂盒

 

StarScript II First-strand cDNA Synthesis Kit(cDNADY链合成试剂盒)是专为两步法RT-PCRDY步实验设计的高灵敏度RT-PCR反应系统，可以从极低量的总RNA或poly(A) mRNA合成DY链cDNA，并能够通读GC含量高、二级结构复杂的RNA模板。该试剂盒使用重组表达的StarScript Reverse Transcriptase (RNase H－)，通过定点突变去除了RNase H的活性，并增加了该酶与模板－引物的亲和力，具有更好的热稳定性，因此其DNA聚合酶的活性和持续合成能力均高于野生型M-MLV反转录酶，合成的cDNA产量更多、更长，最长可合成15 kb的cDNA。本试剂盒含有DY链cDNA合成所需的全部试剂，对后续的PCR或定量PCR实验兼容性好，适合于各种耐热DNA聚合酶。

用途
·  cDNADY链合成
·  引物延伸
 
特点
·  方便快捷：试剂盒包含反转录所需的全部试剂
·  延伸能力：合成的cDNA长度超过4 kb；对具有复杂二级结构的RNA模板，也能在42℃标准反应温度下进行反转录，避免RNA在高温下降解
·  高灵敏度：可对极少量的RNA模板进行良好的反转录反应
·  批次稳定：遵循标准化生产流程，经过严格的质量检测
 
产品组分
以20 μl体系处理5 μg RNA为一个标准反应
  

组成成分	10次反应	50次反应
StarScript RTase (200 U/μl)	10 μl	50 μl
5 X RTase buffer	120 μl	600 μl
0.1M DTT	80 μl	200 μl
RNase inhibitor (RNasin)	8 μl	40 μl
Oligo dT Primer(0.5 mg/ml)	10 ml	50 μl
Random Primer (150 ng/μl)	10 ml	50 μl
10 mM dNTP Mix	15 μl	65 μl
DEPC-ddH2O	200 μl	1 ml

 
保存条件
-20℃恒温保存一年
 
活性定义
一个活性单位的反转录酶定义为在37℃、10分钟条件下，使1 nmol 的脱氧核糖核酸掺入酸性沉淀物质所需的酶量。

5 x反应缓冲液成分
250 mM Tris-HCl (pH 8.3 at 25°C), 375 mM KCl, 15 mM MgCl₂ 

质量控制
·  SDS-PAGE电泳检测纯度≥95%
·  无RNA酶、DNA酶污染

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