SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)优惠促销
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:XH105
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液:10ml,5%BSA
2, 生物素化二抗:浓缩液100ul。
3, SABC-FITC:浓缩液100ul。
4, SABC-POD:浓缩液100ul。
5, 稀释液:30ml。
6, 显色液:20×DAB显色液A,20×DAB显色液B
7, 抗荧光衰减封片剂
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为小鼠/兔IgG/山羊的免疫组化实验. DAB及FITC显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖氨酸。
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸钠缓冲液
4、抗荧光衰减封片剂
实验步骤:
以石蜡切片热修复为例
1. 切片常规脱蜡至水。3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶(如果FITC,刚可省掉此步)。蒸馏水洗3次。
2.热修复抗原:将切片浸入0.01M 枸橼酸盐缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.6)洗涤1-2次。
3.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
4.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
5.根据使用量,用稀释液将生物素化二抗浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul生物素化羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加生物素化羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
如果想用荧光观察,请接下面步骤,如果想用DAB显色,请跳过6-7。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-FITC工作液,20-37℃,30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
如果想用DAB显色,请接8。
8.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
9.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
10.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞片,常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2(如果FITC,刚可省掉此步)处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片,固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。
关于SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)优惠促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·DNA病毒基因组提取试剂盒
编号:XH009
规格:50T/200T
原理简介
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因组,不适合于RNA病毒基因组的提取。本试剂盒利用蛋白酶K破开病毒外壳,放出DNA,用玻璃奶吸附达到纯化目的。
使用本试剂盒提取的DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
注意事项
1.如果病毒含量过低,后提取的基因组DAN电泳可能无法检测到,但PCR等其他实验还会有结果。
2.同一样本,如果想大量提取,可以增加样本量,并且每一步试剂加量,但使用次数会成倍减少。
操作步骤
1、 取病毒上清液0.5ml,12000rpm离心5min,尽量取上清使用,弃去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混匀,65℃消化10-20min,期间可颠倒离心管混匀数次。
3、 向管中加入500ul结合液,充分混匀。
4.玻璃奶摇匀。加入20ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
5.室温放置10分钟(如果玻璃奶加量,请适当延长放置时间,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入30-50ul TE缓冲液混匀溶解,65℃水浴5分钟。离心,取上清为所得DNA。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)优惠促销关键词:SABC双标试剂盒,XH105,免疫组化试剂盒
·抗体稀释液(一抗稀释液)
编号:XH082
规格:10ml/100ml
本抗体稀释液适合于免疫学反应中一抗的稀释。以PBS为基础,加入一定量的BSA,明胶,NaN3等稳定剂,用于一抗稀释和保护。用此产品稀释的一抗,在4度可保存一个月。而在-20度可保存六个月或者更长时间。抗体活性无明显的降低。
此产品不适合于待标记抗体的稀释,也不适合于二抗的稀释。如果用于二抗稀释,可直接用PBS或者其他合适的溶液来稀释。
·全血基因组DNA提取试剂盒
编号:XH016
规格:50T/200T
原理简介
本试剂盒适用于各种动物抗凝全血样本,用于从中提取基因组DNA。独特的裂解缓冲液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物质,并利用玻璃奶吸附DNA,进一步的去掉其他杂质,提取出来,得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR,sequencing,Southern blot,mutant analysis,SNP 等下游应用实验。
注意事项
1.裂解液低温时可能出现析出和沉淀,可以在热水中温浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3.RNaseA经常使用可放2-8度保存,蛋白酶K请放-20度保存。
4.同一样本,如果想大量提取,可以增加样本量,并且每一步试剂加量,但使用次数会成倍减少。
操作步骤
在合适的容器中,用双蒸水将红细胞裂解液(10×)稀释成1×。即10ml溶液中加入90ml双蒸水混匀。
1.取不超过500ul抗凝血,加入三倍体积的稀释过的红细胞裂解液,混匀。放置2分钟,12000rpm离心1分钟。去上清。再加入2倍体积的红细胞裂解液,用移液器轻轻吹打沉淀,充分混匀,离心,弃上清,沉淀为白细胞。如果血液为家擒类动物,因为红细胞有核,所以可以省去此步,但加入的样品量不要超过50ul,直接进入下一步。
2.加入250ul裂解液,加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液,振荡混匀,室温放置5-10分钟。
3.加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液,颠倒混匀,65℃放置10-30分钟,期间颠倒3-5次,小心内心管盖受热开启。如30分钟沉淀无法完全消失,请注意第6步处理。
4,在上清中加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
5.12000rpm离心5分钟,吸去上清,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul结合液,65℃水浴1-2分钟,核酸沉淀可溶解(如无法完全溶解,可转移上清到一新的离心管中,弃沉淀)。
6.玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果玻璃奶加量,请适当延长放置时间,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ul TE缓冲液混匀溶解,65℃水浴5分钟。离心,取上清为所提基因组。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)优惠促销关键词:SABC双标试剂盒,XH105,免疫组化试剂盒
·膜封闭液
编号:XH077
规格:100ml
我公司生产的Western Blot膜封闭液采用经典的脱脂奶粉加入PBS本制,加入侵。02%的叠氮钠,适于在Western Blot实验中封闭转印膜上非蛋白质结合部位,减少一抗及二抗蛋白的非特异性结合,将实验背景降到Z低。该封闭液对 Nitrocellulose、PVDF、尼龙膜等各种转印膜均有较强的封闭效果。
此试剂一般现订现生产,客房拿到手后须一个月内使用。为节省成本,本产品一般可反复使用两到三回。
·FITC-羊抗兔IgG
编号:XH102
规格:0.5ml/5ml
荧光素标记抗体,是目前广泛用于免疫病理、细胞化学、流氏细胞学、病毒学及自身抗体的临床免疫诊断之中的特异、灵敏、定性和定位相结合的免疫化学试剂。
我们生产的荧光素标记羊抗兔IgG是将异硫氰酸荧光素(FITC,来源于SIGMA),经过常规方法标记在抗体羊抗兔IgG(来源于我公司自己纯化的抗体)分子上,经过过柱,透析,定量,加入稳定剂等,制成FITC-羊抗兔IgG。
保存条件:-20℃冻存。浓度:抗体2mg/ml。
应用范围:FITC-羊抗兔IgG主要用于一抗来源于人多抗(单抗也行)的后续实验。如免疫组化。
主要性能:
FITC为Sigma异构体I,Z大吸收峰为495nm,Z大发射峰为525nm。
工作液用0.01mol/L pH7.4PBS作1:5~1:20稀释使用,稀释过的抗体尽快用完,不要冻融。
我公司生产供应销售的细胞及免疫学产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购SABC双标试剂盒(免疫组化试剂盒)优惠促销。
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