His-tag蛋白纯化树脂(镍柱)特价优惠
品Pai:百奥莱博
英文名:His-tag Purification Resin
编号:YT616
产地:国产|进口
本品是一种新型的可以兼容还原剂和螯合剂,并能简单、快速、GX并且高特异性地纯化His标签蛋白的纯化介质。
通常带有6个组氨酸标签的重组蛋白(6xHis-tagged recombinant protein)或带有6个以上连续组氨酸标签的重组蛋白,被称为His标签蛋白。蛋白样品溶液通过本品时,重组蛋白His标签上的组氨酸残基能特异性地结合到本品中的镍离子上,其它蛋白则不能被结合。洗涤后,His标签重组蛋白可在非变性条件下被洗脱,从而被分离纯化。
本产品对His标签重组蛋白的亲和力强、选择性高、结合容量大,使用本产品可以获得高纯度的His标签重组蛋白,可用于简单、快速、GX地纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等多种表达系统中表达的His标签重组蛋白。纯化的蛋白可以用于结构和功能研究、抗体制备、蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。
本产品采用了一种高度交联的6%琼脂糖凝胶(Sepharose CL-6B)为基质,并使用了进一步优化的接臂和镍离子螯合技术,和目前市售的大多数Ni-NTA agarose或类似产品相比,非特异性蛋白结合显著降低,耐受压力强,镍离子螯合非常稳定。和同类产品相比,本产品由于镍离子基本不会流失,重复使用本纯化介质时不需要重新装载镍离子。
Ni-NTA agarose以及绝大多数类似的镍柱产品不能耐受蛋白样品中常见浓度的还原剂如二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等以及常见浓度的螯合剂如EDTA等,但本产品可以很好地耐受DTT等还原剂以及EDTA等螯合剂。本产品可耐受20mM DTT等还原剂,以及20mM EDTA等螯合剂。这为需要添加还原剂或螯合剂的蛋白样品的纯化提供了可能性。本产品不兼容8M尿素和6M盐酸胍。对于包涵体蛋白的纯化,在采用8M尿素或6M盐酸胍溶解蛋白的情况下,需要通过透析去除尿素和盐酸胍后才能使用本产品进行His标签蛋白的纯化。
本产品已经螯合了镍离子,呈蓝色,凝胶的颗粒直径为45-165μm。可耐受的Z大压力为0.025MPa,约合5.8psi。采用固定流速进行蛋白纯化时的推荐流速为0.5ml/min。
本产品可以高容量、高特异性地结合His标签蛋白。Z大蛋白结合量为20-30mg蛋白/毫升凝胶。实际使用时的Z大结合量取决于待纯化的His标签重组蛋白的分子量大小,分子量越大则Z大结合容量越大,分子量越小则Z大结合容量越小。对于分子量为50kD的蛋白,每毫升凝胶的实际Z大纯化量约为6-10mg,对于分子量为100kD的蛋白,每毫升凝胶的实际Z大纯化量约为12-20mg。但对于分子量相同的蛋白,也会因为蛋白本身特性的不同,结合的Z大容量也会有所不同。
本产品储存在30%乙醇中,10ml总体积中5ml为凝胶,5ml为液体。使用时宜把凝胶充分重悬后再吸取。
本产品多可纯化100-150mg带有His标签重组蛋白。对于分子量为50kD的带有His标签重组蛋白,一个包装的本产品实际多可纯化约30-50mg蛋白。
注意事项:
1. 本产品使用过程中,缓冲试剂如Tris、HEPES、MOPS等的浓度不宜超过100mM,EDTA浓度不宜超过20mM,SDS和sarkosyl的浓度不宜超过0.3%,Triton、Tween、NP-40的浓度不宜超过2%,脱氧胆酸钠、CHAPS的浓度不宜超过1%,组氨酸浓度不宜超过20mM,钙离子浓度不宜超过5mM,钠离子和镁离子浓度可以高达2M,甘油浓度可以高达50%。其它未提及试剂的兼容性可以参考上述试剂,但还有待实验验证。
2. 保存和纯化过程中应始终保持凝胶湿润。
3. 若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物,可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。
4. 蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作,并应始终放置在4℃或冰浴,以减缓蛋白降解。为有效YZ蛋白降解,可以在裂解液中添加适量的蛋白酶YZ剂混合物。
5. 若使用本说明书提供的条件无法达到理想的纯化效果,可尝试改变洗涤液和洗脱液中咪唑的浓度和(或)pH,以达到优效果。
储存条件:4℃,有效期一年。
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·DNA聚合酶(高保真)(GX率)(双平端克隆)
编号:YT374
英文名称:Efficient & HiFi DNA Polymerase
规格:200U|1000U
本品是一种超高性能DNA聚合酶,它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。
本品扩增速度极快,扩增小于6kb的DNA片段时,延伸1kb只需要15秒(参考表1)。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。由于其超快的扩增速度,可以显著缩短PCR扩增所需的时间。
本品是一种高保真DNA聚合酶,不仅可以非常GX地催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应,它同时还具有3’至5’的外切酶活性,它的错误发生概率比Taq酶要低52倍,比pfu酶要约低6倍。
本品扩增长度长,可以达到12kb。非常适合长片段DNA的扩增,扩增出来的片段可以轻松达到12kb,更长片段的扩增效果未经测试。本品可以轻松胜任具有复杂二级结构的、非常长的DNA片段的准确扩增,因此它是目的基因扩增和克隆的理想选择。
以λDNA为模板,PCR扩增不同长度(0.5-12kb)片段的的电泳图如下
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、PCR克隆等。扩增出来的DNA片断为双平端,可以直接用于双平端克隆。
来源:通过大肠杆菌重组、表达、纯化而获得。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 74℃
.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v) glycerol。
失活或YZ:酚氯*(代"仿")抽提可以使本酶失活。
注意事项:PCR反应非常灵敏,在进行扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照。
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BTN100201 海量PCR片段纯化试剂盒 Mega PCR Clean-Up Kit
β-葡萄糖苷酶 Sephadex G-200 9001-22-3
ARB10900 人抗斑疹伤寒抗体(Anti-typhus-Ab)检测服务 Human anti-typhus antibody ELISA KIT
D-葡萄糖醛酸内酯 DL-Serine 32449-92-6
ARB10668 人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)elisa检测 Human angiotension Ⅱ receptor 1 antibody,atⅡr1 ab ELISA KIT
高铁血红素白蛋白定性检测试剂盒(Schumm法) 50T
F030422 胶体金标记兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)*GOLD
对氨基苯磺酸 ACES 121-57-3
L-甲硫氨酸乙酯盐酸盐 D-Histidine 2899-36-7
B1101 小牛血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
9048-46-8 牛血清白蛋白(全组分) Albumin Bovine
ARB12862 小鼠心钠肽(ANP)Elisa分析 Mouse atrial natriuretic Peptide,anp ELISA KIT
75621-03-3 CHAPS
ARB11346 人类白细胞抗原A(HLA-A)ELISA检测服务 Human leukocyte antigen a,hla-a ELISA KIT
10323-20-3 D-阿拉伯糖 D-Arabinose
9005-84-9 可溶性淀粉 Starch potato soluble
植物核蛋白/胞质蛋白提取试剂盒 50T|100T
PY01-086 心浸粉(牛) 250克|1公斤
ARB10149 人Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)elisa检测 Human rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2,rock-2 ELISA KIT
加拿大树胶 POPOP 8007-47-4
ARB11331 人胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)elisa检测操作说明书 Human cytosolic phospholipase a2,cpla2 ELISA KIT
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·D-PBS溶液(含钙镁)
编号:YT906
英文名称:Dulbecco"s Phosphate-Buffered Saline(with Ca2+ & Mg2+)
规格:500ml
本品含2.67mM KCl, 1.47mM KH2PO4, 137.93mM NaCl, 8.06mM Na2HPO4,pH值为7.4。本D-PBS溶液经过CJ处理,可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤或其他常规用途。
注意事项:在使用D-PBS的过程中要特别注意避免溶液被微生物污染。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
·ProteasomeYZ剂(MG-132)
编号:YT335
英文名称:Z-Leu-Leu-Leu-CHO
规格:20mg/ml×50μl|5mg|25mg
本品是一种常用的ProteasomeYZ剂,即蛋白酶体YZ剂。MG-132可以通透细胞,选择性YZProteasome,Ki=4nM。可以激活JNK1并YZNF-κB的激活(IC50=3μM)。在10μM时可以诱导PC12细胞产生neurite outgrowth。
CAS:133407-82-6
分子式:C26H41N3O5
分子量:475.62
纯度:>99%
注意事项:本MG-132在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至 全部融解后使用。
储存条件:-20℃,有效期半年。
·AMCA抗兔免疫荧光染色试剂盒
编号:YT103
英文名称:Immunol Fluorence Staining Kit with AMCA-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
规格:>300次
本试剂盒含有AMCA标记的山羊抗兔IgG(H+L)抗体,可以用于检测兔来源的相应一抗,观察到的颜色为非常鲜艳的蓝色。AMCA(7-Amino-4-methylcoumarin-3-acetic acid-NHS ester)是一种常用的非常明亮的蓝色荧光探针。AMCA的吸收峰350nm、发射峰450nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
试剂盒组份:
抗兔AMCA————————————60μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml
注意事项:
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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