产地:国产|进口
规格:200U|1000U
品Pai:百奥莱博
编号:YT375
英文名:Efficient & HiFi DNA Polymerase
本品是一种超高性能DNA聚合酶,它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。
本品扩增速度极快,扩增小于6kb的DNA片段时,延伸1kb只需要15秒(参考表1)。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。由于其超快的扩增速度,可以显著缩短PCR扩增所需的时间。
本品是一种高保真DNA聚合酶,不仅可以非常GX地催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应,它同时还具有3’至5’的外切酶活性,它的错误发生概率比Taq酶要低52倍,比pfu酶要约低6倍。
本品扩增长度长,可以达到12kb。非常适合长片段DNA的扩增,扩增出来的片段可以轻松达到12kb,更长片段的扩增效果未经测试。本品可以轻松胜任具有复杂二级结构的、非常长的DNA片段的准确扩增,因此它是目的基因扩增和克隆的理想选择。
以λDNA为模板,PCR扩增不同长度(0.5-12kb)片段的的电泳图如下
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、PCR克隆等。本品扩增出来的DNA片断为双粘端,可以直接用于T载体克隆
来源:通过大肠杆菌重组、表达、纯化而获得。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid insoluble material in 30 minutes at 74℃
.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v) glycerol。
失活或YZ:酚氯*(代"仿")抽提可以使本酶失活。
注意事项:PCR反应非常灵敏,在进行扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照。
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·线粒体膜电位检测试剂盒
编号:YT148
英文名称:Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1
规格:>100次
本试剂盒是一种以JC-1为荧光探针,快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒,可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以产生红色荧光;在线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-1为单体(monomer),可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降,同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1单体的Z大激发波长为514nm,Z大发射波长为529nm;JC-1聚合物(J-aggregates)的Z大激发波长为585nm,Z大发射波长为590nm。实际观察时,使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。对于六孔板中的样品,本试剂盒共可以检测100个样品;对于12孔中的样品,本试剂盒共可以检测200个样品。
试剂盒组分:
JC-1(200X)——————100μl/管,共5管
超纯水————————90ml
JC-1染色缓冲液(5X)——80ml
CCCP(10mM)——————20μl
注意事项:
1. JC-1(200X)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
2. 必须先把JC-1(200X)用试剂盒提供的超纯水充分溶解混匀后,才可以加入JC-1染色缓冲液(5X)。不可先配制JC-1染色缓冲液(1X)再加入JC-1(200X),这样JC-1会很难充分溶解,会严重影响后续的检测。
3. 装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液(1X)洗涤时,使JC-1染色缓冲液(1X)保持4℃左右,此时的洗涤效果较好。
4. JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
5. 请勿把JC-1染色缓冲液(5X)全部配制成JC-1染色缓冲液(1X),本试剂盒使用过程中需直接使用JC-1染色缓冲液(5X)。
6. 如果发现JC-1染色缓冲液(5X)中有沉淀,必须全部溶解后才能使用,为促进溶解可以在37℃加热。
7. CCCP为线粒体电子传递链YZ剂,有毒,请注意小心防护。
储存条件:-20℃。
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·ARE凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT207
英文名称:ARE Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的ARE consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-ARE的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用 于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
EMSA突变探针-ARE的序列如下:
5"-ACT GAG GGT GAC TCA ATA AAA TC-3"
3"-TGA CTC CCA CTG AGT TAT TTT AG-5"
EMSA突变探针-ARE中ARE的公认的位点发生了突变,从而使相应的转录因子无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常 的标记探针和ARE的结合的条带会被YZ;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和相应转录因子的结合的条带不会被YZ。参考 下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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F030438 胶体金标记山羊抗人IgM抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*GOLD
BTN130907 脱脂奶粉(杂交专用) Nonfat Milk Powder
CBZ-L-苏氨酸 CHC 19728-63-3
ARB11227 人细胞周期素D1(CyclIn-D1)定量分析 Human cyclin-d1 ELISA KIT
HC0149 大龙吸头
BTN100603 银染清除剂 Silver Stain Erasol
ARB13039 小鼠补体片断3A(C3A)血清中含量检测 Mouse complement fragment 3a,c3a ELISA KIT
透明质酸染色液 2×50ml
BFD002 猪蓝耳病毒抗体检测试剂盒
尿胰蛋白酶YZ剂 BTB 164859-77-2
ARB10528 人他克莫司(FK506)ELISA代测服务 Human tacrolimus-fk506 ELISA KIT
ARB12750 小鼠CD3分子(CD3)免费代测 Mouse cluster of differentiation 3,cd3 ELISA KIT
ARB13858 猪可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)酶联免疫定量检测 Porcine soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,vegfr-2/sflk-1 ELISA KIT
BL0825 HRP标记兔抗猴IgG抗体
BTN130996 Cy5-dCTP溶液 Cy5-dCTP Solution
ARB12542 大鼠胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)定量分析 Rat insulin-like growth factor binding protein 1,igfbp-1 ELISA KIT
氧化铋 Aluminon 1304-76-3
亚甲基蓝染色液 0.1%|0.2%|0.5%|1% 100ml
9039-53-6 尿激酶 Urolinase
ARB13939 猪骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)酶免分析 Porcine osteocalcin/bone gla protein,ot/bgp ELISA KIT
PY02-03 平板计数琼脂(SN) 250克
SJ0734 牛外周血细胞分离液
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