大提无内毒素质粒 DNAout10 次品Pai技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并zui大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCRYZ物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
大提无内毒素质粒 DNAout10 次品Pai客户提供
●新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
●4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
●详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供
基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证
高纯度RNA/DNA、完整货期
大提无内毒素质粒 DNAout10 次品Pai详细说明书:
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大提无内毒素质粒 DNAout10 次品Pai注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会
影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
大提无内毒素质粒 DNAout10 次品Pai实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
SHFS-000270500特价促销驱动蛋白家族成员5A(KIF5A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Homo sapiens (Human)组织多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)活性荧光定量检测试剂盒20次
SHFS-000270501特价促销驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Homo sapiens (Human)组织二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量检测试剂盒20次
SHFS-000270502特价促销驱动蛋白家族成员1A(KIF1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Homo sapiens (Human)组织二胺氧化酶(DAO)活性荧光定量检测试剂盒20次
SHFS-000270503特价促销驱动蛋白家族成员18A(KIF18A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Homo sapiens (Human)组织二脂酰甘油(DAG)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒20次
SHFS-000270504特价促销驱动蛋白家族成员14(KIF14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Homo sapiens (Human)组织非蛋白/游离巯基含量比色法定量检测试剂盒20次
SHFS-000270505特价促销驱动蛋白2(KNS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Homo sapiens (Human)组织非蛋白/游离巯基含量荧光定量检测试剂盒20次
SHFS-000270506特价促销巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Mus musculus (Mouse)组织脯氨酸(proline)含量比色法定量检测试剂盒20次SHFS-000571905进口原装 规格: 48T/96TBeta-Nph(Mouse Beta-naphthol) ELISA Kit小鼠β萘酚进口原装 规格: 48T/96TBeta-Nph(Mouse Beta-naphthol) ELISA Kit 小鼠β萘酚
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大提无内毒素质粒 DNAout10 次品PaiSHFS-000571910进口原装 规格: 48T/96TBF ELISA Kit大鼠B因子进口原装 规格: 48T/96TBF ELISA Kit 大鼠B因子
SHFS-000571911进口原装 规格: 48T/96TBF(Human factor B) ELISA Kit人B因子进口原装 规格: 48T/96TBF(Human factor B) ELISA Kit 人B因子