大肠菌群显色培养基成份 (g/L)
特殊营养物质 | 47.55 |
显色剂 | 0.35 |
琼脂 | 13.0 |
pH 7.0-7.2 25 ℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得zui佳的结果。
注意
此培养基仅供实验室使用。
大肠菌群显色培养基用法
称取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸不要超过 1 分钟。分装三角瓶, 116 ℃ 高压灭菌 15 分钟。取 1ml 制备好的样品液加入直径为 9cm 无菌平皿ZX,倾入冷却至 45 -50 ℃ 培养基约15ml ,混匀,凝固后, 36 ± 1 ℃ 倒置培养 18 ~ 24h 。或冷却至 45-50 ℃时,倾入无菌平皿,琼脂完全凝固后,在 37 ℃的培养箱中倒置放置 1-2 小时,加入适当稀释度的样品液 1ml ,涂布于培养基上, 36 ± 1 ℃培养 18 ~ 24h 。
贮存
制备好的平板应立即使用,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处, 保存温度 2-8 ℃,注意避光保存。
失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
操作步骤
1 、按国家标准、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液
2 、取样品液 1ml 加入 冷却至 45-50 ℃显色培养基中混匀或 涂布于平板上
3 、 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h ,选用有 30 ~ 200 个菌落的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。
总大肠菌群 = 蓝绿色菌落
4 、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上, 36 ± 1 ℃ 培养 12-16 小时,挑取单菌落做大肠菌群 BGLB 发酵试验。
质量控制
1 、外观
此干燥培养基的粉末均匀,具有良好的流动性,呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。
2 、微生物试验
在 36 ± 1 ℃ 培养 18 ~ 24h 小时:
质控菌株 | ATCC | 生长情况 | 菌落颜色 |
单增李氏菌 | 27853 | -/+ | 无色 |
金黄色葡萄球菌 | 25923 | -/+ | 无色 |
大肠杆菌 | 25922 | +++ | 蓝色 |
沙门氏菌 | | +++ | 无色 |
大肠菌群 | | +++ | 蓝色 |
方法的局限性
本培养基鉴定 大肠菌群 ,少数情况下可能会出现假阳性,但不会出现假阴性,有时可能需做其它补充试验。
典型特征
大肠菌群典型菌落为蓝绿色,其它细菌为无色或黄色菌落。