Thermo Scientific Super-Signal West Femto底物是使用辣根过氧化物酶标记抗体进行免疫印迹时最灵敏的化学发光底物系统。该底物检测试剂盒在使用合适的一抗和二抗时能够检测硝化纤维素膜或 PVDF膜上低飞克级(low-femtogram,mid-zeptomole)的蛋白。当抗体和封闭液经过成功优化后,SuperSignal* West Femto底物可检测出很多你从来不曾检测出的痕量蛋白。
产品特点:
- 灵敏-可检测出低飞克级(low-femtogram,mid-zeptomole)的目的蛋白
- 节约昂贵的抗体-建议抗体稀释度(从1mg/ml储液):一抗 1/5000-1/100000 二抗 1/100000-1/500000
- 强信号-很容易使用胶片或成像系统捕获图像
- 超长的信号持续时间-8小时
- 可定量-测量的信号跨越两个数量级
使用Thermo Scientific SuperSignal West FemtoZG灵敏度底物可真正实现对IkB的飞克级检测。100 至1飞克连续稀释的样品经4-20%Thermo Scientific Precise蛋白质电泳预制胶分离后转移至PVDF膜,使用Thermo Scientific StartingBlock 封闭缓冲液于室温封闭1小时。印迹在1:1000稀释度的兔抗IkBa(1mg/ml)一抗中于4oC孵育过夜,之后在1:200,000稀释度的山羊抗兔辣根过氧化物酶标记二抗(1mg/ml)中于室温孵育1小时。使用Thermo Scientific CL-XPosure胶片曝光1分钟。
Thermo Scientific SuperSignal West Femto底物比GE Healthcare ECL Plus底物具有更高的灵敏度。将小鼠IL-2进行两倍连续稀释后分别用两种底物进行检测。一抗稀释度为1/2000,二抗稀释度为1/300,000。一抗二抗的储液起始浓度均为1mg/ml。
参考文献:
1. Feissner, R., et al. (2003). Anal. Biochem.315, 90-94.
Adilakshmi, T. and Laine, R.O. (2002). J. Biol. Chem.277, 4147-4151.
Conti, L.R., et al. (2001). J. Biol. Chem.276, 41270-41278.
Guo, Y., et al. (2001). J. Biol. Chem.276, 45791-45799.
温馨提示:不可用于临床ZL。