供应商:
上海臻诺生物
英文名:
TransEasy
保质期:
1年
保存条件:
-20℃
TransEasy转染试剂,病毒生产客户的福利来了产品说明TransEasy转染试剂是一种水溶性的高分子聚合物,可用于细胞转染实验,尤其适合病毒生产。本产品对大多数细胞具有较高的转染效率并适用体内的动物实验。相比于传统的脂质体,本产品具有转染效率高,稳定性好,毒性低,操作简单,适用性广且经济实惠等多项优势。产品内容 名称 | 规格 | 储存条件 |
TransEasy转染试剂 | 1.5 mL | 4℃:3个月,-20℃:1年 |
说明书 | 一份 |
操作步骤(以24孔板为例) - 转染前一天,细胞接种于24孔板中,细胞密度为1x10^5个/ml。
- 稀释质粒。将质粒DNA稀释于50µl无血清、无抗生素的培养基中,混匀。
- 将TransEasy转染试剂加至DNA稀释液中,漩涡振荡器快速混匀,室温孵育15分钟后获得TransEasy/DNA复合物。
- TransEasy/DNA复合物(50µl/孔)滴加至细胞培养基中并轻轻混匀。
- 转染6-8小时后,将原来的培养基更换成新鲜的培养基。24-72小时后可分析TransEasy的转染效率。
表1:不同细胞培养装置转染的细胞接种数量以及相应的转染体系 | 接种细胞量 | 转染DNA量 | 稀释DNA的体积 | TransEasy转染试剂的用量 |
96孔板 | 1 x10^4 | 0.1-0.2µg | 20µl | 0.3-0.6µl |
24孔板 | 5 x10^4 | 0.6-0.8µg | 50µl | 1.8-2.4µl |
12孔板 | 1 x10^5 | 1.2-1.5µg | 100µl | 3.6-4.5µl |
6孔板 | 0.5 x10^6 | 3µg | 200µl | 9µl |
10cm培养皿 | 3-4x10^6 | 8-10µg | 1ml | 24-30µl |
15cm培养皿 | 7 x10^6 | 20-60µg | 2-3 ml | 60-180µl |
TransEasy在不同细胞系的转染效率荧光图
图1TransEasy以24孔形式转染HEK-293、MCF-7细胞系,并在转染后48小时拍照观察GFP表达情况。注意事项: - 细胞的状态直接影响转染效率,推荐在50代以内的细胞用于转染实验。
- TransEasy用量问题。对于大多数的贴壁细胞如HEK-293T、hMSC-TRET、HeLa和MCF-7等,TransEasy(µl)/DNA (µg)的推荐比例为3:1-5:1之间。对于一些不常见或难转染的细胞系,可通过调整TransEasy用量获得的转染比例。
- TransEasy转染试剂切忌反复冻融。
欢迎咨询订购,订购热线:18221746381
温馨提示:不可用于临床ZL。