产品名称:人络氨酸酶(TYR)ELISA试剂盒
产品规格:48T/96T
品Pai:zcibio
实验样本:血清、血浆、细胞上清液、组织等。
适应物种:人、大鼠、小鼠、兔子等。
应用领域:仅供科研实验,不得用于临床诊断。
保存条件:2~8℃,有效期6个月。
产品简介:预期应用:本试剂盒是一个夹心酶免疫分析法体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关生物液体样本中的浓度。
需自备的设备及试剂:
1.450±10nm滤光片酶标仪(建议仪器使用前预热)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3.Eppendorf 移液器.
4.蒸馏水或去离子水.
5.脱脂棉吸水纸.
6.37℃恒温箱.
7.100ml和1000ml量筒.
- 准备若干个标准品稀释管.
标本的采集与保存:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融
2.血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织不对应体积的 PBS(一般按 1:9 的重量体积比,比如 1g 的组织样品对应 9mL 的 PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记彔。推荐在 PBS 中加入蛋白酶YZ剂)加入玱璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于 5000×g 离心 5~10 分钟,取上清检测。
4.细胞培养上清或其他生物标本:
请 1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注意:
1.以上标本均需密封保存,4℃保存应小于一周,-20℃ 不应超过1个月,-80℃保存可放置更久。
2.标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之溶解。
3.标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本说明:
1.本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
2.实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
5.若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
6.某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
实验原理:
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
精密度:
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
警告:
本试剂盒中使用了稀硫酸作为终止液,其具有轻微腐蚀性,使用时应避免接触衣物或眼、手等皮肤暴露部位。
优势:采用全进口原料和抗体:GX、灵敏、特异,严格引进国际技术标准进行批量生产。先进的优化方案:稳定的重复性和可靠性。提供免费代测服务(为客户提供来样检测服务,限度实验结果的有效性)产品质量保证,提供全程技术指导。友情提醒:试剂盒使用完毕后,请妥善处理相关耗材,避免环境污染!
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