RIPA裂解液(中)_详细资料

产品信息

保存条件： -20℃ 供应商：上海晅科生物科技有限公司保质期： 12个月英文名： RIPA Lysis Buffer 数量： 100 规格： 100ml

RIPA裂解液(中)产品简介：
1. 我们生产的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。
2. RIPA即Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。
3. RIPA裂解液(中)的主要成分为SDS、NP-40 、sodium deoxycholate 及aprotinin等多种蛋白酶YZ剂，可以有效YZ蛋白降解。
4. 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用我们生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
使用方法:
对于培养细胞样品：
1. 取适当量的 RIPA 裂解液混匀，在使用前数分钟内加入 PMSF（货号 WB0114），使 PMSF 的浓度为 1mM。
2. 对于贴壁细胞，去除培养液用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍，加入适量裂解液，用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触，轻轻的摇晃约 5-10 分钟，充分裂解后，10000-14000g 离心 10钟，取上清，即可进行后续操作。
裂解液用量说明：用于不同规格标准培养板裂解液容量
板规格/表面积试剂容量
100mm 500-1000μι
60mm 250-500μι
6-well plate 200-400μιper well
24-well plate 100-200μιper well
96-well plate 50-100μιper well
3. 对于悬浮细胞，离心收集细胞，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍，加入适量裂解液，用枪吹打把细胞吹散，用手指轻弹或旋涡震荡 5-10 分钟以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装然后再裂解，充分裂解后，10000-14000g 离心 10 分钟，取上清，即可进行后续操作。
对于组织样品：
1.手术切除的组织块迅速置于预冷的生理盐水中，漂洗数次，以清洁表面的血迹，将组织称量后切成几个较小的组织块放入组织匀浆器中。
2. 取适当量的 RIPA 裂解液混匀，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的浓度为 1mM。
3. 按组织净重（g）：裂解液(ml)=1：10 的比例，加入相应体积的裂解液进行匀浆(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液如果需要高浓度的蛋白样品可以适当减少裂解液的用量) 。
4. 用匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 离心 3- 5 分钟，取上清，即可进行后续作。
注：RIPA 裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组 DNA 等的复合物。
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温馨提示：不可用于临床ZL。

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