Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 细胞增殖与活性检测试剂盒是一种基于SST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。其主要成分为水溶性四唑盐SST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),SST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的水溶性的甲臜。SST-8 被细胞内脱氢酶生物还原后生成的甲臜能够直接溶解在培养基中。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
本试剂盒提供了一种灵敏度高,操作简便,使用安全的细胞增殖与活性检测方法。与传统的MTT实验相比具有明显的优势:
1. MTT实验生成的甲臜不是水溶性的,需要使用DMSO等有机溶剂溶解;而本方法产生的甲臜是水溶性的,不仅省去了溶解步骤,更因此而减少了该操作步骤带来的误差。
2. 与MTT方法相比,本方法线性范围更宽,灵敏度更高。
3. 本方法对细胞无毒性,可以多次测定,选取测定时间。
4. 本方法所用试剂在培养基中比MTT更加稳定,实验结果重复性好。
MTT具有毒性,同时其生成的甲臜需要有机溶剂溶解,会对操作人员身体造成危害。本试剂无毒,使用中无需有机溶剂,操作更加安全。
本试剂盒可以用于生物活性因子的活性检测,抗肿瘤药物的筛选,细胞增殖的测定,细胞毒性检测以及药敏等与细胞活性和增殖相关的实验。本试剂盒使用方便,试剂盒包含一管已经配制好的含有SST-8的CCK-8溶液,即开即用,无需其他准备步骤。检测过程也无需采用额外的步骤去溶解甲臜,可直接使用96孔板或者384孔板在酶标仪上检测,适合大规模,高通量的样品检测。
CCK-8溶液在避光,0-5°C的条件下可以保存一年,如长期保存,可在-20°C下避光保存2年,如需经常使用请将试剂存放在0-5°C,为防止背景值增加干扰实验结果,请勿反复冻融。
温馨提示:不可用于临床ZL。