样品类型(SAMPLE TYPES):
标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积=100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
标本处理:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
◇血清:
室温血液自然凝固10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/ 分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
◇血浆:
应根据试剂盒的要求选择EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10 %(v/v )抗凝剂(0.1M 柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20 分钟后,离心20 分钟左右(2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
◇尿液、胸腹水、脑脊液:
用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
◇细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS (PH7.2-7.4 )稀释细胞悬液,细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右(2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
◇组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS ,缓冲液中可加入1 μg/L 蛋白酶YZ剂或50U/ml 的Aprotinin (抑肽酶)。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右(2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清置于-20 度或- 70 度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
检测原理:
采用双抗体夹心ABC-ELISA法
保存温度:2-8℃保存6个月.
注意事项:
收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70 度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
备注:以上为ELISA试剂盒通用说明书,不包括特别的试剂盒,具体的请参照每个产品的说明书