小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取物品Pai【Mouse Lung: Normal Vein Smooth Muscle Cell Derivatives】
小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取物是从小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取的，小鼠肺大静脉平滑肌细胞从正常小鼠肺大静脉组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。 蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western ａnd Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
本公司供应的细胞，提供售前售后一条龙服务，若要获取详细的
小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取物品Pai说明书或价格信息。
小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取物品Pai培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取物品Pai运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取物品Pai细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取物品Pai培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
小鼠转化生长因子α(TGF-α)elisa试剂盒英文名称：Mouse transforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit规格:96T/48T人前心钠肽(Pro-ANP)ELISA Kit，48T/96T
大鼠树突状细胞表面特异性C型凝集素-细胞间黏附分子3结合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)英文名称：Rat DC specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing nonintegrin,DC-SIGN/CD209 ELISA Kit规格:96T/48T小鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA Kit，48T/96T
大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Protein Phosphatase,PP ELISA Kit规格:96T/48T大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9) ELISA Kit，48T/96T
大鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒英文名称：Rat Complement 3,C3 ELISA Kit规格:96T/48T大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA Kit，48T/96T
大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒英文名称：Rat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit规格:96T/48T大鼠活化素A受体抗体((ACV-RAb)ELISA Kit，48T/96T
大鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒英文名称：Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit 规格:96T/48T大鼠巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA Kit，48T/96T
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit规格:96T/48T猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA Kit，48T/96T
大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA试剂盒英文名称：Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit规格:96T/48T小鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA Kit，48T/96T
大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒英文名称：Rat nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA Kit规格:96T/48T小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA Kit，48T/96T
小鼠肺大静脉平滑肌细胞提取物品Pai大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒英文名称：Rat cardiac troponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA Kit规格:96T/48T鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA Kit，48T/96T
大鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒英文名称：Rat Vitamin C,VC ELISA Kit规格:96T/48T人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA Kit，48T/96T
胶体金标记的羊抗小鼠IgMGoat Anti-Mouse IgM/Gold0.5ml
大鼠髓过氧化物酶MPO ELISA Kit96T
PE-CY5标记的兔抗猪IgGRabbit Anti-pig IgG/PE-CY50.1ml
Cy5标记的羊抗小鼠IgGGoat Anti-Mouse IgG/Cy50.1ml
人甘露糖MN(Human Mannose) ELISA Kit96T
Alexa Fluor 488标记的小鼠抗人IgMMouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 4880.1ml
转移生长因子β3（TGFβ3）抗体 英文名称：TGF beta 30.1ml
SLFNL1抗体 英文名称：SLFNL10.2ml
抑癌基因SSDP2抗体 英文名称：SSBP20.2ml
磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 英文名称：phospho-RPS6KB1(Ser417)0.1ml
蛋白磷酸酶2C亚型α抗体 英文名称：PP2CA0.1ml
沪公网安备 31011502008050号
