肾小管 shènxiǎoguǎn renal tubule 与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用（secretion）.肾小管按不同的形态结构，分布位置和功能分成三部分；近端小管，细段和远端小管。肾小管在肾髓质中。其中，小鼠肾管状上皮细胞传5代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然肾小管上皮组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肾小管上皮组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的肾小管上皮组织片能使得肾小管上皮细胞的一些功能特性发生改变，从而将肾小管上皮细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养小鼠肾小管上皮细胞。本体系提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维YZ体系，可以程度地降低所培养的肾小管上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠肾小管上皮细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的肾小管上皮细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠肾小管上皮细胞组织解离液 (3×1ml) （2）小鼠肾小管上皮细胞组织处理缓冲液 (100ml) （3）FibrOutTM小鼠肾小管上皮细胞成纤维YZ剂 (1ml（500x）) （4）小鼠肾小管上皮细胞组织洗液(5 x 100 ml) （5）小鼠肾小管上皮细胞生长因子（1ml500x）及血清（5x10ml） （6）小鼠肾小管上皮细胞基础培养基(5 x 100ml) （7）小鼠肾小管上皮细胞组织预备液 (1 x 100 ml) （8）小鼠肾小管上皮细胞培养试剂盒使用说明书
小鼠肾小管上皮细胞培养试剂盒品Pai运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．小鼠肾小管上皮细胞培养试剂盒品Pai细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
小鼠肾小管上皮细胞培养试剂盒品Pai培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
兔子免疫球蛋白M(IgM)elisa试剂盒 英文名称： rabbit Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit 规格:96T/48T人未基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA Kit，48T/96T
猴巨噬细胞移动YZ因子(MIF)ELISA试剂盒英文名称：Monkey Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit规格:96T/48T人天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)ELISA Kit，48T/96T
人凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒英文名称：Human apoptosis inducing factor，AIF ELISA Kit规格:96T/48T人角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA Kit，48T/96T进口/原装
人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒英文名称：Human tissue inhibitor of metal protease 1，TIMP-1 ELISA Kit规格:96T/48T小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA Kit，48T/96T 特价促销
人EB病毒IgG(EBv IgG)ELISA试剂盒英文名称：Human epstein-barr virus IgG，EBv IgG ELISA Kit规格:96T/48T小鼠白介素15(IL-15)ELISA Kit，48T/96T 进口/原装
人2，3-二磷酸甘油酸(2，3-DPG)ELISA试剂盒英文名称：Human 2，3-Disphosphoglycerate，2，3-DPG ELISA Kit规格:96T/48T兔子转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA Kit，48T/96T 特价促销
大鼠γ氨基酸(GABA)ELISA试剂盒英文名称：Rat Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit规格:96T/48T鸡主要组织相容性复合体(MHC/B)ELISA Kit，48T/96T
植物维生素C(VC)ELISA试剂盒 英文名称：Plant Human Vitamin C,VC ELISA Kit 规格:96T/48T
人心纳素(ANF)ELISA试剂盒 英文名称：Human atrial natriuretic factor，ANF ELISA Kit规格:96T/48T小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA Kit，48T/96T 进口/原装
人抗型肝炎病毒IgG抗体(anti-HAV)ELISA试剂盒 英文名称：Human anti-hepatitis A virus IgG antibody，anti-HAV ELISA Kit规格:96T/48T小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA Kit，48T/96T特价促销
小鼠肾小管上皮细胞培养试剂盒品Pai人雌三醇(E3)ELISA试剂盒英文名称：Human Estriol，E3 ELISA Kit规格:96T/48T人白介素4(IL-4)ELISA Kit，48T/96T 进口/原装
紧密连接蛋白1抗原CLDN1(Claudin 1) 0.5mg
型肝炎病毒（抗原）HEV 0.5mg
纤维母细胞生长因子7抗体 英文名称：KGF 0.1ml
E-钙粘附分子抗原E-cadherin 0.5mg
多巴胺受体-D5抗原DRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 0.5mg
T淋巴细胞凋亡相关蛋白TDAG51抗体 英文名称：PHLDA1 0.1ml
瘦素（抗原)Leptin 0.5mg
脑肠肽28Ghrelin 28 0.5mg
碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗小鼠k链Rabbit anti-mouse Kappa light chain/AP 0.1ml
荧光素Cy5.5标记兔IgG(细胞流式同型对照)Rabbit IgG/Cy5.5 0.1ml
阴离子转运蛋白-1（大、小鼠同源：人源见bs-0606P）OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 0.5mg
沪公网安备 31011502008050号
