产品描述:前列腺上皮细胞在炎症,肿瘤转移中发挥重要作用。在前列腺癌中,前列腺癌细胞在微血管上皮细胞之间的相互作用,在前列腺肿瘤转移中发挥重要作用。研究结果表明,前列腺上皮细胞,可积极参与前列腺增长。公司提供的前列腺上皮和肿瘤原代细胞均来自新鲜组织,用于前列腺上皮和肿瘤原代细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司产品前列腺上皮和肿瘤原代细胞培养试剂盒(HumanProstatePrimaCell™:NormalHumanProstateEpithelialCellsandCerebellarCarcinomaCellsCatNo.3-4232)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下,人前列腺上皮和肿瘤原代细胞分别在3-5代和10代仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程,保证细胞的纯度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基;2、说明书及注意事项;3、技售后服务标准。
保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
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人前列腺MatchPair™:前列腺上皮细胞和肿瘤原代细胞品Pai运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.人前列腺MatchPair™:前列腺上皮细胞和肿瘤原代细胞品Pai细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
人前列腺MatchPair™:前列腺上皮细胞和肿瘤原代细胞品Pai培养细胞冻存方案:
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/3/636874649147978498.png)
oup of -6-CAS号:88569-83-9分子量: C7H10N2O
5-吲唑分子式:133.15英文名称:Aminoindazole 5-CAS号:19335-11-6分子量: C7H7N3
3,5-二氯-4-氟硝分子式:209.99英文名称:3,5- two -4-CAS号:3107-19-5分子量: C6H2Cl2FNO2"
"苜蓿中华根瘤菌人肾透细胞皮肤转移细胞
30%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
藤仓赤霉 Gibberella fujikuroi爪哇根霉
rCSC, 大鼠心肌细胞U-2 OS, 人骨肉瘤细胞
屎肠球菌 Enterococcus faecium嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti香菇 Lentinula edodes
人脐静脉血管内皮细胞CCD-1095Sk(人腺浸润性导管旁皮肤细胞)
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii爱媛链轮丝菌 Streptomyces ehimense
褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum人盲肠腺细胞(未分化)
人前列腺MatchPair™:前列腺上皮细胞和肿瘤原代细胞品Pai2-溴-5-氯甲分子式:205.48英文名称:2- -5- chlorideCAS号:14495-51-3分子量: C7H6BrCl
2,3-二氟甲分子式:128.12英文名称:2,3- two fCAS号:3828-49-7分子量: C7H6F2
4-氯联分子式:188.65英文名称:4- chlorideCAS号:2051-62-9分子量: C12H9Cl
双喹啉分子式:396.95英文名称:Double iodineCAS号:83-73-8分子量: C9H5I2NO
氟铝(无水)分子式:83.98英文名称:Aluminium fluoride (anhydrous)CAS号:7784-18-1分子量: AlF3
2,3,4,5-四氟溴分子式:228.97英文名称:2,3,4,5- PTFE BromophenylCAS号:分子量: C6HBrF4
2-甲-5-乙吡分子式:121.2英文名称:2- methyl -5- ethyl pyridineCAS号:104-90-5分子量: C8H11N
去甲异波尔定英文名称:Norisoboldine分子式:313.3511分子量:C18H19NO4CAS号:23599-69-1
对硝甲英文名称:Para nitro toluene分子式:137.14分子量: C7H7NO2CAS号:99-99-0
10-羟癸英文名称:10- hydroxy decanoic acid分子式:188.26分子量:C10H20O3CAS号:1679-53-4"