人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒操作说明

人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)elisa试剂盒由上海古朵供应，上海古朵生物专业经营进口分装和原装标准品|对照品、国产/进口elisa试剂盒，国产/进口血清，生化试剂，培养基等科研生化试剂等。免费提供产品报价、实验原理、产品用途以及中英文说明书。我司多年为各大院校，各类医院，生物工程医药实验室以及其他行业科研消费者提供Z全面、Z周到的采购，上海古朵欢迎您的来电订购！

名称：人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒
英文名：Human peptide major histocompatibility complex,pMHC ELISA Kit
产地：国产/进口
参数规格：48T/96T
样本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
产品特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
产品用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒操作说明 操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。



人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒操作说明 操作步骤：
1. 取出试剂盒，于室温(20-25℃)放置15-30分钟。实验过程应在室温(20-25℃)内进行。
2. 取出酶标板，按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的样品，空白对照加入50μl的蒸馏水；
4. 在样品孔中加入10μl的生物素；(不含空白对照孔,切忌：生物素只加样品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶标记溶液；(不含空白对照孔)
6. 将酶标板用封口胶密封后，37℃孵育反应 1小时；(在孵育箱中保持稳定的温度与湿度)
7. 充分清洗酶标板3-5次，保持各孔有充足的水压；(浓缩洗涤液以1：100的比例与蒸馏水稀释)
8. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干；
9. 各孔加入显色剂A、B液各50μl；(不含空白对照孔)
10. 20-25℃下避光反应15分钟；
11.各孔加入50μl终止液，终止反应。



人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒操作说明 操作注意事项：
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。



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