Hcy,人同型半胱氨酸ELISA试剂盒说明书用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人同型半胱氨酸(Hcy)的含量。
Hcy,人同型半胱氨酸elisa试剂盒说明书
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人同型半胱氨酸(Hcy)的含量。
有效期:6个月
保存条件:2-8℃
本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人同型半胱氨酸(Hcy)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的人同型半胱氨酸(Hcy)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
Hcy,人同型半胱氨酸ELISA试剂盒说明书实验标本采集必修课:
1)标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2)血清:使用不含热原的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
3)血浆:3000转离心30分钟取上清。
4)细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
5)组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
6)保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
常见问题解析:
1.加样量不一致?
解决方法:样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。
2.样品数量多少不一,加样时间有长有短?
解决方法:重复某一样品时,加样时间尽可能与次接近。
3.保温时间不一致,洗涤条件不一致,操作人员不一致?
解决方法:重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性。
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。
应用领域:
1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
2、研究抗酶抗体的合成。
3、显现微量的免疫沉淀反应。
4、定量检测体液中抗原或抗体成份。
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