2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
GOY-0000065559802Human signal recognization particle antibody,SRP elisa试剂盒规格:96T/48THuman intact Parathormone ,i-PTH ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559803Human Sialic acid,SA ELISA试剂盒规格:96T/48THuman insulin-like growth factors binding protein 4,IGFBP-4 ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559804Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA试剂盒规格:96T/48THuman insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559805Human sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA试剂盒规格:96T/48THuman insulin-like growth factors binding protein 2,IGFBP-2 ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559806human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,GSK2 ISA KIT规格:96T/48THuman insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559807human serum deprivation response,SDPR ELISA试剂盒规格:96T/48THuman insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559808Human Serum amyloid P,SAP ELISA试剂盒规格:96T/48THuman insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559809human serum amyloid A3,SAA3 ELISA试剂盒规格:96T/48THuman Insulin,INS ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559810Human Serum amyloid A,SAA ELISA试剂盒规格:96T/48THuman Insulin Receptor β,ISR-β ELISA试剂盒规格:96T/48T
GOY-0000065559811Human Serotonin,ST ELISA试剂盒规格:96T/48Thuman Insulin receptor substrate 2,IRS-2 ELISA试剂盒规格:96T/48T