细胞名称 人乳腺癌细胞;HS578T操作步骤
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 Hs 578T是混合多边形形态,其中星状细胞类型被选择用于在通道和克隆。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2~1:6传代;2~3天换液1次。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,X;CSF1PO:13,13;D12S391:19,19;D13S317:11,11;D16S539:12,12;D18S51:16,16;D19S433:14,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:17,26;D3S1358:16,16;D5S818:11,11;D6S1043:12,12;D7S820:10,10;D8S1179:13,13;FGA:23,24;Penta E:13,14;TH01:9,9.3;TPOX:8,8;vWA:17,17;
同工酶
染色体
使用权限 A类
人乳腺癌细胞;HS578T操作步骤 复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过Z易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
人乳腺癌细胞;HS578T操作步骤 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
英文名称:ChrysinCAS:480-40-0白杨素用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C15H10O4纯度:≥98%植物来源:
英文名称:ChrysoeriolCAS:491-71-4金圣草(黄)素用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C16H12O6纯度:≥98%植物来源:
英文名称:ChrysophanolCAS:481-74-3大黄酚用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C15H10O4纯度:≥98%植物来源:
英文名称:Chrysophanol 1-glucosideCAS:4839-60-5大黄酚-1-O-葡萄糖苷用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C21H20O9纯度:≥98%植物来源:
英文名称:Chrysophanol 8-O-glucosideCAS:13241-28-6芦荟大黄素8-O-葡糖苷大黄酚用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C21H20O9纯度:≥97.5%植物来源:
英文名称:ChrysosplenetinCAS:603-56-5猫眼草黄素用途:本品用于含量测定,药理科研。包装内附产品质量检测及鉴定报告,因为品质是企业的决战场,是基业长青的保证,我公司提供的一切产品仅供科研,实验室用,不得用于注射,食用或者其他用途。公式:C19H18O8纯度:≥98%植物来源:
62996-74-12~8℃K0127星孢菌素/链霉菌属十字孢碱/十字孢碱/星形孢菌素/Staurosporine from Streptomyces sp.USP级,95%100微克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,
中文名称: 星孢菌素
其他中文名称: 链霉菌属十字孢碱;十字孢碱;星形孢菌素
英文名称: Staurosporine from Streptomyces sp.
其他英文名称: Antibiotic AM-2282
产品规格: 试剂级
包装:1毫克/100微克
CAS号:62996-74-1
C28H26N4O3=466.53
人乳腺癌细胞;HS578T操作步骤级别:Reagent grade
含量:≥95.0%(HPLC)
性状:粉末,溶于DMSO、甲醇、乙醇,不溶于水。
用途:生化研究。Potent inhibitor of phospholipids/calcium-dependent protein kinase.
保存:2~8℃
人乳腺癌细胞;HS578T操作步骤培养温馨提示:
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