1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再 用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
黑色素细胞生长因子5mL图片操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
莱苞迪甙A;莱苞迪苷ALai?bract?rebaudioside?A;?Lai?bract?Di?glycoside A58543-16-1HPLC≥98%,10mg/支
远志皂苷元Tenuigenin 2469-34-3HPLC≥98%,20mg/支
远志酸Polygalacic acid22338-71-2HPLC≥98%,20mg/支
异欧前胡素ISO?Europe?before Hu Su482-45-1HPLC≥98%,20mg/支
欧前胡素Imperatorin 482-44-0HPLC≥98%,20mg/支
染料木苷;4',5,7-三羟异黄酮-7-Genistein;?4 ',?5,7- three hydroxy?isoflavone -7-529-59-9HPLC≥98%,20mg/支
染料木素;染料木黄酮;金雀异黄酮Genistein;?genistein;?genistein446-72-0HPLC≥98%,20mg/支
大豆苷元;大豆甙元;黄豆苷元Daidzein;?daidzein;?Daidzein486-66-8HPLC≥98%,20mg/支
大豆苷Daidzin552-66-9HPLC≥98%,20mg/支
黄豆黄素Glycitein40957-83-3HPLC≥98%,20mg/支
黄豆黄苷Soy?Daidzein40246-10-4HPLC≥98%,20mg/支
迷迭香酸Rosmarinic acid 20283-92-5HPLC≥98%,20mg/支
鼠尾草酸Carnosic acid3650/9/7HPLC≥98%,20mg/支
Na-对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐/Na-P-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐/TAME,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,1784-03-82~8℃,避光BR,98%1克A0149
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai,5克
中文名称: Na-对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐
其他中文名称: Na-P-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐
英文名称: TAME
其他英文名称: Na-p-Toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester HC1;Tos-Arg-OMe?HCl
产品规格: BR,98%
包装:1克/5克/25克
CAS号:1784-03-8
C14H22N4O4S? HCl =378.88
级别:BR
含量:≥98.0%
熔点:145~147℃
黑色素细胞生长因子5mL图片比旋光度:-13.0~-15.0°(C=2,H2O)
层析试验:合格
性状:粉末,溶于水、甲醇
用途:生化研究。胰蛋白酶(trypsin)、凝血酶(thrombin)、血纤维蛋白溶酶(plasmin) 和其它蛋白酶的底物
保存:2~8℃,避光