大提柱式真菌 DNAout4次图片特点1.离心柱法;2.快速:30min内即可完成全部操作;3.得率高:无需裂解红细胞,直接从全血中提取DNA,可从0.2 mL健康人类全血中提取得到不低于3μg DNA;4.操作简便:无需水浴,全部提取操作可在室温下进行;5.高质量:所提取的DNA纯度高、得率高,可直接用于PCR、酶切、杂交等下游实验。
大提柱式真菌 DNAout4次图片公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
大提柱式真菌 DNAout4次图片服务流程:
1)客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
大提柱式真菌 DNAout4次图片 详细介绍:
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大提柱式真菌 DNAout4次图片技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCRYZ物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
大提柱式真菌 DNAout4次图片注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程,建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞,消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞,需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,PI摄入过多;消化时间过长,细胞膜同样易造成损伤,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后,轻摇时胰酶与细胞充分接触,然后倒掉大部分胰酶,利用剩余的少量胰酶再消化一段时间,待细胞间空隙增大,瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA,EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 实验中如需要固定细胞,比如在检测凋亡的同时检测细胞周期,只能选用Annexin V-FITC,而不能选用Annexin V-EGFP,因为在固定过程中EGFP会变性导致丧失激发荧光的能力。固定前需要先将细胞与Annexin V-FITC进行孵育,并用binding buffer洗掉未结合的Annexin V-FITC。因为固定过程中细胞通透性增加会产生细胞碎片,可以和Annexin V结合,对结果产生干扰。
4) 如果样品来源于血液,请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS,能与Annexin V结合,从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
5) 试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
6) Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。
大提柱式真菌 DNAout4次图片实验步骤
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
6902-77-8226.22586C11H14O51,4a,5,7a-Tetrahydro-1-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-cyclopenta(c)pyran-4-carboxylic acid methyl ester京尼平
528-43-8266.33C18H18O2Magnolol厚朴酚
1124-11-4136.19C8H12N2tetramethylpyrazine川芎嗪
4046-02-0222.23716C12H14O4ethyl 4-hydroxy-3-methoxycinnamate阿魏酸乙酯
546-43-0232.32C15H20O2Alantolactone土木香内酯
1063-77-0514.57C28H34O9Nomilin诺米林
518-17-2303.36C19H17N3OEVODIAMINE吴茱萸碱
84-26-4287.32C18H13N3Orutecarpine吴茱萸次碱
80681-45-4468.45112C22H28O11prim-O-Glucosylcimifugin升麻素苷
82854-37-3786.73C35H46O20echinacoside松果菊苷
84272-85-5452.45172C22H28O104'-O-beta-D-Glucosyl-5-O-methylvisamminol5-O-甲基维斯阿米醇苷S01861-苯基-3-吡唑烷酮/菲尼酮/菲尼酮A/3-甲基-1-苯基-吡唑啉-5-酮/1,3,5-吡唑酮/3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮/1-苯基-3-吡唑啉酮/1-苯基-3-氧-1,2-二氮杂茂/1-苯基-3-吡唑酮/1-苯-3-吡唑啉酮/Phenidone 92-43-3RTCP50克国产 S0190硫堇/劳氏青莲/劳氏紫/氯化-3,7-二氨基吩噻嗪/7-氨基-3-亚氨基-3H-苯并噻嗪氯化氢/3,7-二氨基吩噻嗪-5-翁氯化物/硫槿/氯化劳氏紫/Thionin581-64-6RT,避光BR1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai, S0191酒石黄/肼黄/食用柠檬黄/酸性黄23/1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三钠盐/食用色素黄色5号/他特秦/ Tartrazine1934-21-0RTBS,85%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai, 25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai, 100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai, 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai, S0192诱惑大提柱式真菌 DNAout4次图片红/6-羟基-5-[(2-甲氧基-5-甲基-4-磺本基)偶氮]2-萘磺酸二钠盐/诱惑红AC/食品红17/大红贝司RC/显色基艳红RB/咖喱红/红 40 [CI 16035]/C.I.冰染重氮组分13/Allura Red AC25956-17-6RTAR,85%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai, 100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai, 500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、