引物设计与合成试验检测_详细资料

产品信息

1. 提供引物设计的参考序列，设计原理和分析报告，让您对您的引物或探针的性能和特点有一个全面的了解，便于您对实验结果的认识和分析。2. 可提供扩增前的与处理及扩增后服务：包括，核酸提取，pcr，核酸纯化，序列分析，数据统计等服务。引物设计与合成试验检测 3. 一次的服务，全程的保障。

引物设计与合成试验检测

在PCR（聚合酶链式反应）技术中，已知一段目的基因的核苷酸序列，根据这一序

列合成引物，利用PCR扩增技术，目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA

聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环，延伸后得到的产物同样可以和引物结合。PCR引物设计的目的是找到一对合

适的核苷酸片段，使其能有效地扩增模板DNA序列。如前述，引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。对引

物的设计不可能有一种包罗万象的规则确保PCR的成功，但遵循某些原则，则有助于引物的设计。折叠引物的设

定区域

DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件

引物设计与合成试验检测

（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。折叠引物长度一般在15~30碱基之间

引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于

Taq DNA 聚合酶进行反应。折叠引物GC含量在40%~60%间，Tm值Z好近72℃
GC含量（composition）过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外，上下游引物的

Tm值（melting temperature）是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。有效

启动温度，一般高于Tm值5~10℃。若按公式Tm= 4（G+C）+2（A+T）估计引物的Tm值，则有效引物的Tm为

55~80℃，其Tm值Z好接近72℃以使复性条件。引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因

为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于

Taq DNA 聚合酶进行反应。折叠引物GC含量在40%~60%间，Tm值Z好近72℃

GC含量（composition）过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外，上下游引物的

Tm值（melting temperature）是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。有效

启动温度，一般高于Tm值5~10℃。若按公式Tm= 4（G+C）+2（A+T）估计引物的Tm值，则有效引物的Tm为

55~80℃，其Tm值Z好接近72℃以使复性条件。
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