HeLa [ Chang Liver ](张氏肝细胞) 

HeLa [ Chang Liver ]（张氏肝细胞）培养和细胞融合溶液
（一）0.01mol／LPBS（磷酸盐缓冲液 Phosphate Buffer Saline，PBS）pH7.2。
0.2mol／L 磷酸氢二钠液（甲液）：
NaH2PO4·12H2O 35.814g
双蒸水 加至 500ml
0.2mol／L 磷酸二氢钠液（乙液）:
NaH2PO4·12H2O 15.601g
双蒸水 加至 500ml
取甲液 36ml，乙液 14ml 和 NaCl8.2 克，加双蒸水至 1000ml。混匀待完全溶解分装，经高压灭菌后保存于 4℃冰箱备用。
（二）50％PEG（聚乙二醇 Polyethyleneglycol mwl500）
称取 0.5 克 PEG，用前放入试管中在酒精灯火焰上熔化，加入等量 37℃予热的 MEM 培养液，混匀，保温在 37℃水浴中待用。
（三）MEM 培养液（含 10％小牛血清）
MEM 培养液（日本制药株式会社） 9.4g
双蒸水 1000ml
NaHCO3 1.5g
谷氨酰胺（L-glutamin） 0.292g
56℃灭活 30 分钟的小牛血清 110ml
MEM 粉末加水溶解后，用 NaHCO3 调 pH 到 7.1（因在抽滤过程中 pH 升高 0.2～0.3），然后加灭活的小牛血清和谷氨酰胺，待完全溶解后，立即用 G6 抽滤CJ，分装，置 4℃冰箱保存备用。
（四）0.25％胰蛋白酶一 0.02％EDTA 混合消化液
胰蛋白酶（Trypsin）粉 0.25g
EDTA 粉 20.0mg
0.01mol／L PBS 100ml
先用少量 PBS 溶解胰蛋白酶，然后将 EDTA 粉末和剩下的液体加入混合，置 37℃水浴中1 小时左右（待彻底溶解，液体呈透明为止），用 G5 抽滤，分装置 4℃冰箱中保存。
（五）Hanks 液
1．原液甲
NaCl 160g
KCl 8g
MgSO4·7H2O 2g
MgCI2·6H2O 2g
溶于 800ml 馏水中。
CaCl2（无水） 2.8g
溶于 100ml 蒸馏水中。
将两种液体混合后，加水至 1000ml 用滤纸滤过，再加 2ml 氯仿防腐，置 4℃冰箱备用。
原液乙
Na2HPO4·12H2O 3.04g
KH2PO4 1.2g
葡萄糖 20.0g
溶于 800ml 蒸馏水中，用滤纸过滤，然后加 0.5％酚红 80ml，再加水至 1000ml，加入 2ml 氯仿防腐，置 4℃冰箱备用。
2．使用液
甲乙两液各 1 份，双蒸水 18 份，混匀分装包扎好瓶口，经 10 磅 15 分钟高压灭菌后置4℃冰箱中保存。使用时用 5.6％NaHCO3 调 pH 值到所需要求。
（六）1640 培养液（含 lO％小牛血清）
RPMI-1640 粉 10.39g
双蒸水 加至 1000ml
通入适量的 C02 气体，边通入 CO2 边慢慢搅拌，使其（呈透明）完全溶解。用 NaHCO31.5克调 pH 值到 7.2。
双抗 1 万 u/ml 10ml
灭活小牛血清 110ml
混匀上述液体，立即用 G6 抽滤CJ分装，置 4℃冰箱备用。
（七）青、链霉素溶液
青霉素钠盐（40 万 u／瓶） 5 瓶
链霉素（100 万 u／瓶） 2 瓶
将两者溶于 200ml0.9％的无菌生理盐水，分装小瓶，-30℃保存。双抗在培养基中的终浓度为各 lOOu 为宜。
（八）二甲基亚砜诱导 HL-60 细胞分化使用的终浓度为 1。4％。
（九）BrdU 溶液（200ug/m1）
用无菌青霉素瓶，在室温下称取 1.0mg，在无菌条件下加入灭菌生理盐水 9.0ml，溶解，混匀，用黑纸包严，避光置冰箱冰格中保存。Z好用时现配。
（十）2×SSC 溶液
用分析天平称取氯化钠 17.53 克，柠檬酸钠 8.82 克溶于蒸馏水中，加蒸馏水至 1000毫升。
（十一）3％琼脂：
取琼脂粉 3 克，加入双蒸水到 100 毫升，搅匀，高压消毒后（15 磅 20 分钟），冷藏备用，使用前重新加热煮沸（贮存时间不宜过长）。
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