ELISA试剂盒注意事项:
1.血清标本如是以无菌操作聚集,则可以在2~8℃下保留一周,如为有菌把持,则首倡冰冻冷藏。样本的经久保存,应在-70℃如下。
2.在使用微量加样器时,汲取一致瓶子中液体后要更改枪头,即使汲取规范品溶液。
3.孵育时要使盖板膜封好酶标板,防止水份挥发,以防曲线弗成线性。
4.手工洗板时每次退出洗濯液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗濯液溅入另外一酶标孔中,防止交叉净化。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
5.检测吸光度前应将酶标仪翻开,将其预热30min以上。
6.标本在保管中如呈现细菌感染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA酶联检测试剂盒
操作
1. 标准品溶解:加入230 μl DMSO 溶解1mg 多肽配成母液(1mM)。
2. 取母液稀释成2×10-5mM,2×10-6mM,2×10-7mM (PBS with 0.05%Tween-20和1%BSA)
3. 包被:每孔加100μl 标准品稀释液(对照组是试剂盒里的浓度为2×10-6mM),空白组加100μl PBS 4℃ 过夜。
4. 洗涤:PBS(加0.05%Tween-20和0.1%BSA)1次(每次30秒)
5. 封闭:5%脱脂奶粉(每孔250μl)(20℃ 2小时)
6. 洗涤:PBS(加0.05%Tween-20和0.1%BSA)1次(每次30秒)
7. 抗体:每孔加100μl Mouse Anti-β-Amyloid1-16 1:2000稀释。(20℃ 1小时)
8. 洗涤:PBS(加0.05%Tween-20和0.1%BSA)10次(每次30秒)
9. 二抗:每孔加100μl Goat Anti mouse IgG(H+L), HRP conjugated 20℃ 0.5小时)
10. 洗涤:PBS(加0.05%Tween-20和0.1%BSA)10次(每次30秒)
11. 显色:每孔加100μl TMB显色液显色15分钟(室温)
人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA酶联检测试剂盒
的结果分析及相关软件
间接ELISA要是试剂盒,会有标准品的,把标准品按一定浓度梯度稀释一块儿做(一般有三个重复),酶标仪或分光光度计比色,用软件(oringe)绘制标准曲线,的出公式,按公式将样品带入公式,
用于ELISA结果计算Z方便的是logit曲线。曲线的横坐标用标样各浓度(ng/ml 或其他单位)的自然对数表示,纵坐标用各浓度显色值的logit值表示。
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