本试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体样本中内蒙古 传染病检测ELISA试剂盒说明书价格的含量。实验原理:ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方
一、内蒙古 传染病检测ELISA试剂盒说明书价格特点1.将酶催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高度专一性、特异性相结合,以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂进行免疫测试,所以具有很高的灵敏度。
2.实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。
3.其抗原抗体反应具有高度的特异性。
4.为浓缩液,配有稀释液,稀释后直接可用,无需另行配置。
二、目的:本试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体样本中内蒙古 传染病检测ELISA试剂盒说明书价格的含量。
实验原理:ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
三、自备材料
1)蒸馏水。
2)加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3)振荡器及磁力搅拌器等。
四、ELISA试剂盒安全性:
1)避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3)不要用嘴吸取ELISA试剂盒里的任何成份。
五、内蒙古 传染病检测ELISA试剂盒说明书价格组成
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | |
标准品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
终止液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
六、ELISA试剂盒检测程序
建立标准曲线:设标准孔8孔,每孔中各加入样品稀释液100ul,孔加标准品100ul,混匀后用加样器吸出100ul,移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第六孔,,从第六孔中吸出100ul弃去。第七孔为空白对照,第八孔为零孔。
加样:待测品孔每孔各加入待测样品100ul混匀。
将反应板充分混匀后粘上封板纸置37 oC 120分钟。
洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。
每孔(除零孔)加抗体工作液50ul,置37℃ 60分钟。
洗板:同前。
每孔(除零孔)加酶标抗体工作液100ul(两滴),将反应板置37 oC 60分钟。
洗板:同前。
每孔加入底物液A、B各一滴,置37 oC避光反应15分钟。
每孔加入1滴终止液混匀。
在450nm处测吸光值。
七、内蒙古 传染病检测ELISA试剂盒说明书价格样品收集、处理及保存方法
1.血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3.细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5.保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
八、结果判断:
1.以标准品的浓度为横坐标,化学发光值为纵坐标,绘出标准曲线。亦可以化学发光值为横坐标,标准品的浓度为纵坐标,绘出标准曲线。
2.推荐使用专业的曲线制作软件,如curve expert 1.3或1.4,在软件界面既可根据样品化学发光值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;亦可将样品的化学发光值代入标准曲线的拟合方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3.若样品化学发光值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。
ELISA试剂盒局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
九、内蒙古 传染病检测ELISA试剂盒说明书价格操作注意事项:
1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
十、ELISA试验所需自备物品:
1.化学发光检测仪
2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL
3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4.吸水纸
十一、ELISA试剂盒安全性:
1)避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3)不要用嘴吸取ELISA试剂盒里的任何成份。
十二、内蒙古 传染病检测ELISA试剂盒说明书价格常见问题解答
问:测出来的标准曲线值前面几盒都是0.98 才正常,后面怎么0.93了?
答:某个点偏离大可以去掉,保留5个点
问:是不是空白对照就是什么都不加?
答:不加样本 不加样本稀释液 不加酶标试剂 其他都可以加、
问:样本稀释液是配好的吗?
答:样本稀释液是配好的
问:样本稀释液可以用来直接稀释血清吗?
答:可以的,直接加40ul就可以了
问: 酶标板分次使用 剩下的建议怎么保持 ?
答:要是真的用不完或标本不多的情况下。做点处理后:板条和板架都是可拆卸的,可以再用之,前拆下4条放置锡箔袋或其他无污染的袋子,放到冰箱 2-8度保存。
问:酶标包被版是酶标板吗?
答:是的
问:96t可以检测多少个样本?48t可以检测多少个样本?
答:96t标准的可以检测85个样本,其他有10个标准品孔,1个空白对照
96t单孔可以检测90个样,7个标准品控 1个空白对照
48t标准的可以检测37个样本,其他有10个标准品孔,1个空白对照
48t单孔可以检测40个样本,其他有7个标准品孔,1个空白对照
问:那标准品出现跳孔是怎么回事?
答:你完全可以拿同样的标准品再重新做一次 ,做之前摇匀一下,肯定可以做好 。那是操作问题了 ,你可以再做一次的,之前也有客户出现过类似的问题 学生做了2次都没做好 后来老师自己做 就是摇匀了一下,其他操作都一样 标准曲线做的很。
问:建议标准做复吗?
答:标准品做复孔是Z好的
问:36个样品,定96T的,可以测一个重复吧
答:可以
问:Elisa方法的不测人血小板第四因子里IgG抗体的滴度吗?
答:Elisa不测滴度的,荧光法可以测
问:酶标板不平,影响结果吗。
答:不影响结果的。
问:样本稀释液可以用来直接稀释血清吗?
答:可以的,直接加40ul就可以了
十三、计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
十四、关于我们
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