产品简介
产品名称:膜辅蛋白,内源性辅助因子活性蛋白抗体(人)
浓 度: 1mg/1ml贮 存: 贮存于-20℃.
亚 型: IgG
性 状: Lyophilized or Liquid
规 格: 0.1ml/0.2ml
储 存: -20℃环境下存放. 封闭保存,否则会降低产品含量.
克 隆 性: 是
适应物种: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Sheep,
克隆类型:多克隆,单克隆
应用领域:本产品仅供科研使用,不做其他用途
抗体:是高等动物在抗原物质的刺激下由浆细胞产生的一类能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。抗体通常存在于血清。
单克隆抗体及多克隆抗体:由单一克隆的细胞(通常是单一克隆的杂交瘤细胞)所产生的识别某一抗原表位的单一抗体;多克隆抗体是由多种细胞分别接触相应抗原而产生的多种抗体的总和,多克隆抗体抗原识别抗原的多个表位。
抗体结构:抗体是由四条肽链构成的“Y”形对称的分子,包括两条重链和两条轻链。在“Y”的部位的氨基酸顺序在不同的抗体分子中差别很大,是负责与抗原进行特异性结合的区域,称为可变区,余下的区域则称为恒定区。
工作原理
抗体作用原理:
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。
(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
储存方式
抗体具体保存方法
大部分抗体收到后4℃短暂保存1-2周对抗体活性是没有影响的。
如果抗体很快(1-2周)会使用,推荐在4℃保存,这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害。如果要长期保存则Z好是在-20℃ or -80℃。Z关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体!但是,腹水形式的产品请在收到后立即冻起来!因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4℃保存会导致抗体的降解!
大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要3-4周的时间,所以是在4℃的条件下来完成的。4℃运输Z主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻。这就多了一次冻融的过程)。所以运输过程中避免干冰运输!
选择要点
如何正确选择“膜辅蛋白,内源性辅助因子活性蛋白抗体(人)”?
抗体的种类繁多,各种来源和标记令人眼花缭乱,供应商也参差不齐。如何选择合适的抗体确实是个令人头痛的问题,不妨从下面几个方面着手选择:
1 特异性:抗体能否特异性地结合特定的抗原,自然是选择正确抗体的关键。同时还需要关注抗体特异识别抗原的部位,交叉反应性和抗原抗体结合的亲和力。特异性与抗体制备时使用的抗原和抗体纯化工艺密切相关。
2 来源和标记:通常单克隆抗体来源于小鼠,多克隆抗体来源于兔和山羊;以生物素,各种酶和荧光素标记,可根据实验需要来选择。
3 应用:不同的抗体能应用于不同的实验,如ELISA,IHC,FC,WB和体内功能性实验等等,往往需要通过相应的实验来验证,实验时根据样本和目的不同来选择。
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常见问题
抗体质量问题出现的原因及解决对策
绝大多数的抗体供应商都致力于提供高质量的抗体,然而,由于研究用抗体生产和销售相关的公司数量庞大,难免有缺乏职业道德的供应商存在。不同供应商/分销商常常采用不同的质量控制标准,有的很严格,有的根本不存在。使用这些抗体的科研人员一定要与特定的抗体供应商直接联系来发现或讨论他们的质量控制过程。更麻烦的是有的抗体供应商/分销商更改抗体的产品目录号或批号, 或单抗的克隆名。改变抗体编号,再加上有些抗体本身质量不高,造成了现在抗体市场混乱中一个Z严重的问题。也就是说,如果一个抗体不合格,抗体使用者倾向于从其他供应商那里购买第二个抗体,却并不知道第二个抗体是不合格的个抗体改了目录号或者批号又重新销售的。一些不合格的抗体甚至能在短期内给抗体供应商/分销商提供丰厚的收益。因此,对于每一个抗体使用者来说,确保购买的第二个抗体不是改版的个抗体是极其必要的。
除了个别不法分子的存在以外,导致大量不合格的研究性抗体有多重的原因:
1)难以获得对特定抗原特异性的抗体,
2)缺乏理想的抗体纯化方案,
3)污染和储存问题,
4)其他问题。
注意事项
1)对荧光标记的抗体的稀释,要保证抗体的蛋白有一定的浓度,一般稀释度不应超过1:20,抗体浓度过低,会导致产生的荧光过弱,影响结果的观察。
2)染色的温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化,染色时间可以从10 min到数小时,一般30 min已足够。染色温度多采用室温(25℃左右),高于37℃可加强染色效果,但对不耐热的抗原(如流行性乙型脑炎病毒)可采用0-2℃的低温,延长染色时间。低温染色较37℃30 min效果好的多。
3)为了保证荧光染色的正确性,首次试验时需设置下述对照,以排除某些非特异性荧光染色的干扰。
① 标本自发荧光对照:标本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
② 特异性对照(YZ试验):标本加未标记的特异性抗体,再加荧光标记的特异性抗体。
③ 阳性对照:已知的阳性标本加荧光标记的特异性抗体。
如果标本自发荧光对照和特异性对照呈无荧光或弱荧光,阳性对照和待检标本呈强荧光,则为特异性阳性染色。
4)一般标本在高压 灯下照射超过3min,就有荧光减弱现象,经荧光染色的标本Z好在当天观察,随着时间的延长,荧光强度会逐渐下降。