单克隆抗体,抗丁酰胆碱脂酶单克隆抗体

产品简介
产品名称：抗丁酰胆碱脂酶单克隆抗体
浓 度： 1mg/1ml贮 存： 贮存于-20℃.
亚 型： IgG
性 状： Lyophilized or Liquid
规 格： 0.1ml/0.2ml
储 存： -20℃环境下存放. 封闭保存,否则会降低产品含量.
克 隆 性： 是
适应物种： Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Sheep,
克隆类型：多克隆，单克隆
应用领域：本产品仅供科研使用，不做其他用途
抗体：是高等动物在抗原物质的刺激下由浆细胞产生的一类能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。抗体通常存在于血清。
单克隆抗体及多克隆抗体：由单一克隆的细胞（通常是单一克隆的杂交瘤细胞）所产生的识别某一抗原表位的单一抗体；多克隆抗体是由多种细胞分别接触相应抗原而产生的多种抗体的总和，多克隆抗体抗原识别抗原的多个表位。
抗体结构：抗体是由四条肽链构成的“Y”形对称的分子，包括两条重链和两条轻链。在“Y”的部位的氨基酸顺序在不同的抗体分子中差别很大，是负责与抗原进行特异性结合的区域，称为可变区，余下的区域则称为恒定区。
工作原理
抗体作用原理：
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。
（2）激活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
选择要点
如何正确选择“抗丁酰胆碱脂酶单克隆抗体”？
抗体的种类繁多，各种来源和标记令人眼花缭乱，供应商也参差不齐。如何选择合适的抗体确实是个令人头痛的问题，不妨从下面几个方面着手选择：
1 特异性：抗体能否特异性地结合特定的抗原，自然是选择正确抗体的关键。同时还需要关注抗体特异识别抗原的部位，交叉反应性和抗原抗体结合的亲和力。特异性与抗体制备时使用的抗原和抗体纯化工艺密切相关。
2 来源和标记：通常单克隆抗体来源于小鼠，多克隆抗体来源于兔和山羊；以生物素，各种酶和荧光素标记，可根据实验需要来选择。
3 应用：不同的抗体能应用于不同的实验，如ELISA，IHC，FC，WB和体内功能性实验等等，往往需要通过相应的实验来验证，实验时根据样本和目的不同来选择。
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注意事项
1）对荧光标记的抗体的稀释，要保证抗体的蛋白有一定的浓度，一般稀释度不应超过1：20，抗体浓度过低，会导致产生的荧光过弱，影响结果的观察。
2）染色的温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化，染色时间可以从10 min到数小时，一般30 min已足够。染色温度多采用室温（25℃左右），高于37℃可加强染色效果，但对不耐热的抗原（如流行性乙型脑炎病毒）可采用0-2℃的低温，延长染色时间。低温染色较37℃30 min效果好的多。
3）为了保证荧光染色的正确性，首次试验时需设置下述对照，以排除某些非特异性荧光染色的干扰。
① 标本自发荧光对照：标本加1-2滴0.01mol/L，pH7.4的PBS。
② 特异性对照（YZ试验）：标本加未标记的特异性抗体，再加荧光标记的特异性抗体。
③ 阳性对照：已知的阳性标本加荧光标记的特异性抗体。
如果标本自发荧光对照和特异性对照呈无荧光或弱荧光，阳性对照和待检标本呈强荧光，则为特异性阳性染色。
4）一般标本在高压 灯下照射超过3min，就有荧光减弱现象，经荧光染色的标本Z好在当天观察，随着时间的延长，荧光强度会逐渐下降。
常见问题
供应免疫组化问题解答:
1 染色过强
原因 解决方法
a 抗体浓度过高或孵育时间过长 降低抗体滴度、抗体孵育时间：室温1小时或4度过夜
b 孵育温度过高超过37度 一般在室温20-28度
c DAB显色时间过长或浓度过高 显色时间不超过5-12分钟，以显微镜下观察为准
2 非特异性背景染色
原因 解决方法
a 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3次每次5分钟
b 组织中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长
c 组织中含内原性生物素 正常非免疫动物血清再封闭
d 血清蛋白封闭不充分 延长血清蛋白封闭时间
3 染色弱
原因解决方法
a 抗体浓度过低、孵育时间过短 提高抗体浓度、孵育时间不能少 于60分钟
b 试剂超过有效使用时间 应更换试剂
c 操作中添加试剂时缓冲液未沥干 每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液
使试剂稀释 （应防止切片干燥）
d 室温太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分钟或4 度冰箱过夜
e 蛋白封闭过度 封闭不要超过12分钟
4 染色阴性
原因解决方法
a 操作步骤错误 应重试 设阳性对照
b 组织中无抗原 设阳性对照以验证试验结果
c 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗二抗种属无误。
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