猴痘病毒抗体 Simian Pox Virus(SPV)ELISA试剂盒公司现货报价

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

ELISA试剂盒检测程序

建立标准曲线：设标准孔8孔，每孔中各加入样品稀释液100ul，孔加标准品100ul，混匀后用加样器吸出100ul，移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第六孔，，从第六孔中吸出100ul弃去。第七孔为空白对照，第八孔为零孔。

加样：待测品孔每孔各加入待测样品100ul混匀。

将反应板充分混匀后粘上封板纸置37 ℃ 120分钟。

洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。

每孔（除零孔）加抗体工作液50ul，置37℃ 60分钟。

洗板：同前。

每孔（除零孔）加酶标抗体工作液100ul（两滴），将反应板置37 ℃ 60分钟。

洗板：同前。

每孔加入底物液A、B各一滴，置37 ℃避光反应15分钟。

每孔加入1滴终止液混匀。

猴痘病毒抗体  Simian Pox Virus(SPV)ELISA试剂盒公司现货报价应用
1.免疫酶染色各种细胞内成分的定位。
2.研究抗酶抗体的合成。
3.显现微量的免疫沉淀反应。
4.定量检测体液中抗原或抗体成分。

ELISA试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%

猴痘病毒抗体  Simian Pox Virus(SPV)ELISA试剂盒公司现货报价中的洗涤
洗涤是ELISA实验中是Z多次数的操作，也是非常重要的步骤。不严格的洗涤容易出现洗不干净或交叉污染现象，实验重复效果差的现象。不管用多道加样器、洗瓶、吸管，还是洗板机，严格按照说明书操作不要减少步骤洗涤的洗涤体积、洗涤时间和洗涤次数。注意标准化操作将减少实验误差和不同实验之间的误差。操作者常出现洗板不干净现象，请比照操作： 
a)洗液不要溢出孔外，以免污染相邻的孔，特别是每次洗板的前两遍，若高浓度的孔污染了低浓度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定会ZG。 
b)特别注意：设计实验的时候要考虑实验孔的位置，保证甩掉洗液时，空白孔、低浓度孔或阴性对照组在上面或一侧或分开Z好。同时注意甩掉洗液的动作翻转（从正上方旋转120－150度）要迅速、干脆。甩板不要手腕左右摇摆、旋转来甩液体！甩出后以直线方式补2－3次甩出液体。  
c)用干净的滤纸，不要用卫生纸，因为细小粉尘或者碎屑容易吸附到孔底，导致洗板不干净，结果偏高或偏低，重复孔的数值也会相差很大。
d)每次拍板不要重复在一个地方拍，特别是洗去酶的步骤；拍板不宜过轻，否则拍不干净，拍板很用力不会对蛋白有什么影响。但注意不要太重，以至把板条给拍断。每次洗板后轻叩几下，一次一定要扣干净。
e)不能减少洗液体积、洗板时间和次数。洗板时间太短，洗板效果不佳。延长洗板时间和增加洗板次数可以使背景更干净。

检测范围和保存条件及有效期              
1.试剂盒保存：2-8℃
2．有效期：6个月

计算
  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
 
猴痘病毒抗体  Simian Pox Virus(SPV)ELISA试剂盒公司现货报价操作注意事项：
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
9）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
10）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
11）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
 检测范围：1ng/L -30ng/L
 
常见问题
问：那我们算出来的ACH含量为什么出现负值？
答：说明个别样本的浓度很低，当浓度接近第6个点的时候  直线方程就有可能计算出负值
问：一个孔需要多少量的血清？
答：一个孔上样量10-50微升。

问：那标准品出现跳孔是怎么回事？
答：你完全可以拿同样的标准品再重新做一次 ，做之前摇匀一下，肯定可以做好 。那是操作问题了 ，你可以再做一次的，之前也有客户出现过类似的问题 学生做了2次都没做好 后来老师自己做 就是摇匀了一下，其他操作都一样 标准曲线做的很。
问：建议标准做复吗？
答：标准品做复孔是Z好的
问：36个样品，定96T的，可以测一个重复吧
答：可以

问：Elisa方法的不测人血小板第四因子里IgG抗体的滴度吗？
答：Elisa不测滴度的，荧光法可以测
问：酶标板不平，影响结果吗。
答：不影响结果的。
问：样本稀释液可以用来直接稀释血清吗？
答：可以的，直接加40ul就可以了
 问：那我们算出来的ACH含量为什么出现负值？
答：说明个别样本的浓度很低，当浓度接近第6个点的时候  直线方程就有可能计算出负值
问：一个孔需要多少量的血清？
答：一个孔上样量10-50微升。

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