JEB-10572人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。
一、JEB-10572人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒工作原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
二、性能特点:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%.
三、检测范围和保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃;
2.有效期:6个月。
四、JEB-10572人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
五、操作注意事项:
1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
9)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
10)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
11)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
JEB-10572人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒检测范围:1ng/L -30ng/L
六、小问题回答
问:那我们算出来的ACH含量为什么出现负值?
答:说明个别样本的浓度很低,当浓度接近第6个点的时候 直线方程就有可能计算出负值
问:一个孔需要多少量的血清?
答:一个孔上样量10-50微升。
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JEB-10572 南京 人刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒说明书
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