脂质运载蛋白(Eotaxin 1/CCL11) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝 色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Eotaxin 1/CCL11) 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸 光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11) 浓度。
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右 (2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量 的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备 用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤 1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100μl,然后在、第二孔中加标准品稀释液 50μl,混匀;然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四 孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取 50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第 十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng /L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品
孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
YS01159B人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)Elisa快速检测试剂盒
YS01160B人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)Elisa快速检测试剂盒
YS01161B人碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)Elisa快速检测试剂盒
YS01162B人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)Elisa快速检测试剂盒
YS01163B人凋亡相关因子配体(FASL)Elisa快速检测试剂盒
YS01164B人凋亡相关因子(FAS)Elisa快速检测试剂盒
YS01165B人E选择素(E-Selectin)Elisa快速检测试剂盒
YS01166B人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1)Elisa快速检测试剂盒
YS01167B人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)Elisa快速检测试剂盒
YS01168B人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)Elisa快速检测试剂盒
YS01169B人睫状神经营养因子(CNTF)Elisa快速检测试剂盒
YS01170B人CD30分子(CD30)Elisa快速检测试剂盒
YS01171B人CXC趋化因子受体1(CXCR1)Elisa快速检测试剂盒
YS01172B人XC趋化因子受体1(XCR1)Elisa快速检测试剂盒
YS01173B人二级淋巴组织趋化因子(SLC)Elisa快速检测试剂盒
YS01174B人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)Elisa快速检测试剂盒
YS01175B人脑源性神经营养因子(BDNF)Elisa快速检测试剂盒
YS01176B人白细胞活化黏附因子(ALCAM)Elisa快速检测试剂盒
YS01177B人活化素A(ACV-A)Elisa快速检测试剂盒
YS01178B人神经调节蛋白1(NRG-1)Elisa快速检测试剂盒
YS01179B人心钠肽(ANP)Elisa快速检测试剂盒
YS01180B人多巴胺D2受体(D2R)Elisa快速检测试剂盒
YS01181B人内肽-2(EM-2)Elisa快速检测试剂盒
YS01182B人α-内肽(α-EP)Elisa快速检测试剂盒
YS01183B人YZ素(INH)Elisa快速检测试剂盒
YS01184B人神经元凋亡YZ蛋白(NAIP)Elisa快速检测试剂盒
YS01185B人食欲素/阿立新B(OX-B)Elisa快速检测试剂盒
YS01186B人促睡眠肽(DSIP)Elisa快速检测试剂盒
YS01187B人6-羟多巴胺(6-OHDA)Elisa快速检测试剂盒
YS01188B人心纳素(ANF)Elisa快速检测试剂盒
YS01189B人神经髓鞘蛋白(p2)Elisa快速检测试剂盒
YS01190B人精氨酸加压素(AVP)Elisa快速检测试剂盒
YS01191B人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)Elisa快速检测试剂盒
YS01192B人微管相关蛋白2(MAP-2)Elisa快速检测试剂盒
YS01193B人神经丝蛋白(NF)Elisa快速检测试剂盒
YS01194B人利钾尿肽(KP)Elisa快速检测试剂盒
YS01195B人神经降压素(NT)Elisa快速检测试剂盒
YS01196B人神经激肽B(NKB)Elisa快速检测试剂盒
YS01197B人强啡肽(Dyn)Elisa快速检测试剂盒
YS01198B人脑啡肽(ENK)Elisa快速检测试剂盒
YS01199B人γ肽(Pγ)Elisa快速检测试剂盒
YS01200B人C型钠尿肽(CNP)Elisa快速检测试剂盒
YS01201B人阿立新A(OrexinA)Elisa快速检测试剂盒
YS01202B人神经肽Y(NP-Y)Elisa快速检测试剂盒
YS01203B人脑肠肽(BGP/Gehrelin)Elisa快速检测试剂盒
YS01204B人乙酰胆碱(ACH)Elisa快速检测试剂盒
YS01205B人脑钠素/脑钠尿肽(BNP)Elisa快速检测试剂盒
YS01206B人细胞角蛋白20(CK20)Elisa快速检测试剂盒
YS01207B人β内啡肽(β-EP)Elisa快速检测试剂盒
YS01208B人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)Elisa快速检测试剂盒