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名称:禽流感病毒H9亚型血凝YZ试验抗原、阳性血清特价优惠
品Pai:百奥莱博
编号:DL034
规格:2ml×2
产地:国产|进口
【兽药名称】
通用名 禽流感病毒H9亚型血凝YZ试验抗原、阳性血清
商品名 无
英文名称 AIV H9 Antigen,Positive Sera for Haemagglutination Inhibition Test
汉语拼音 Qinliugan Bingdu H9 Xueningyizhi Shiyan Kangyuan Yangxingxueqing
【产品内容】
主要成分 数 量
禽流感病毒H9亚型血凝YZ试验抗原 2ml×1
阳性血清 2ml×1
使用说明书 1份
【成分性状】
抗原含灭活的H9亚型禽流感病毒,血凝效价≥1:512;阳性血清为H9亚型禽流感高免的SPF血清,HI效价≥1:512。
【作用与用途】
用于血凝YZ试验检测H9亚型禽流感病毒抗体(血清、卵黄)。
【用法与判定】
1 血凝(HA)试验操作方法
1.1 在96孔微量板上,用加液器每孔加入PBS缓冲液25μl。
1.2 取25μl抗原,从第1孔起,依次作2倍系列稀释至第12孔,混合,弃去25μl。
1.3 每孔加入25μl PBS缓冲液。
1.4 每孔加入25μl 1%鸡红细胞悬液,每块板上设稀释液和红细胞悬液对照孔。
1.5 将微量板置振荡器上振荡30秒,置2~8℃作用45分钟,判定结果。
1.6 结果判定 将微量板倾斜45度,对照孔的红细胞应完全沉淀到孔底ZX,呈泪珠样流淌;阳性孔的红细胞则均匀分布于孔底或呈锯齿样凝集,使红细胞完全凝集的稀释倍数为该抗原的HA效价。
1.7 工作抗原的配制 如果抗原凝集价测定结果为1:256(举例),则4个HA单位为1:64(256÷4=64),这时可将HI抗原用PBS缓冲液稀释64倍,即成4 HA单位的工作抗原液。
2 血凝YZ(HI)操作方法
2.1 在96孔微量板上,每行从第2孔开始,每孔加入25μl PBS缓冲液,直至第12孔。
2.2 分别在第1、2、12孔中加入处理过的卵黄上清或待检血清25μl。
2.3 用加样器从第2孔起作2倍系列稀释,直至第10孔(血清稀释倍数从第1孔的1:4、第2孔的1:8……至第10孔的1:2048),弃去25μl。
2.4 向第1~11孔中加入25μl 4 HA单位的抗原,在微量振荡器上振荡30秒,室温下作用30分钟。
2.5 每孔加入25μl红细胞悬液,振荡30秒,放2~8℃下反应30~45分钟,判定结果。
2.6 判定 判定时将微量板倾斜45度,只有当抗原对照孔(第11孔)中红细胞完全凝集,血清对照孔(第12孔)中的红细胞完全沉淀时,当阴性血清HI抗体效价不高于1:8,阳性血清HI抗体效价与已知效价相比误差不高于1个滴度时,试验方为成立。若红细胞沉淀呈泪珠样流淌,判为HI阳性;若红细胞在孔底均匀分布或呈锯齿状凝集,判为HI阴性。以完全YZ红细胞凝集的稀释倍数作为待检样品的HI抗体效价。
【注意事项】
(1)对HA和HI试验结果影响因素很多,应严格按照试验程序进行操作,尤其应注意试验温度和作用时间。
(2)准确配制1%鸡红细胞悬液,使用时应充分摇匀。
(3)准确配制4 HA 单位的工作抗原,使用前需进行滴定,配制好的工作抗原应在2小时内用完。
(4)抗原及阳性血清按规定在-20℃以下冷冻保存,使用时融化后摇匀;抗原应根据所测样品的数量用多少稀释多少,未用完的抗原仍在-20℃以下冷冻保存,该抗原可反复冻融。
(5)本抗原使用应按实验室生物安全有关规定进行操作,用完的器皿、吸头等应彻底消毒。
【贮藏与有效期】-20℃保存,有效期为12个月
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