荷叶碱中药对照品

保 质 期：2年

操作流程
荷叶碱中药对照品HPLC法测定血栓心脉宁胶囊中丹酚酸B的含量

     血栓心脉宁胶囊系由川芎、丹参、槐花、麝香等l0味中药 组成的FF中药制剂，具有芳香开窍、HX散瘀的功能，用于 脑血栓、冠心病、心绞痛等属血瘀证者。丹酚酸B为其有效成 分之一，有关控制含丹参及其制剂的质量已有报道【1-4]，为了 更有效地控制该制剂的质量，本文首次采用HPLC法测定血 栓心脉宁胶囊中丹酚酸B的含量，该方法操作简便，重复性、 准确性均好，可用于该制剂的质量控制。

 

1 仪器与试药

 

美国惠普公司HP一1 100型GX液相色谱仪，G1314A可变 波长紫外检测器，G1311A四元低压泵，HP化学工作站。 丹酚酸B对照品(批号：111562—200403，由ZG药品生物 制品检定所提供)。血栓心脉宁胶囊(吉林华康药业股份有限 公司，批号：060601、060602、060603)。其他试剂均为发析纯。

 

2 方法与结果

 

2．1 色谱条件丹酚酸B色谱柱：ZORBZX SB—CI8(4．6 mmx 250mm，5 m)；流动相：甲醇一乙腈－－0．5％甲酸溶液(30：9：61)， 流速：1．0mIJmin，检测波长为286nm，柱温：3O℃，进样量5 L。 理论板数以丹酚酸B计，应不得少于3000。

 

2．2 溶液的制备

 

2．2．1 供试品溶液的制备取本品1O粒，除去胶囊，研细，取 0．3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75％甲醇50 mL，称定重量，超声处理(功率250W，频率25KHz)30 min，再称定 重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即 得。

 

2．2．2 对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， ~175％甲醇溶解，配制成含丹酚酸B 200 mL的溶液，作为 对照品溶液。

 

2．2-3 阴性对照液的制备按CF配比投入无丹参的其他 药材和辅料，制成空白制剂，按样品溶液制备方法制备。

 

2．3 干扰性试验在“2．1”项色谱条件下，分别取丹酚酸B对 照品溶液、阴性对照溶液、供试品溶液各5 L注入色谱仪，记 录色谱图。结果显示，在此条件下，血栓心脉宁胶囊中各组分 分离度效果良好，其他组分不干扰丹酚酸B的测定。(见图1— 3) 2．4 线性关系考察精密称取丹酚酸B对照品溶液(294．2 ~ mL)1．0 L、3．0 L、5．0 L、7．0 L、10．0 txL，注入液相色谱 仪，按上述条件测定，以峰面积为纵坐标、进样量( g)为横坐 标进行线性回归，得回归方程，丹酚酸B：y=1089．45x一29．3416， 线性范围0．29—2．94 g，r=-O．9999。

 

2．5 精密度试验精密吸取0．1942 mg／mL的丹酚酸B对照品 溶液5 p,L，各进样5次，记录色谱图，结果丹酚酸B峰面积RSD％ =0．44％，表明仪器精密度良好。

 

2．6 稳定性试验取丹酚酸B同一供试品溶液，分别于0h,2h、 4 h、8 h、24 h注入GX液相色谱仪，测定含量，计算得RSD％ 为1．00％(n=5)，表明供试品溶液在24 h内稳定。

 

2．7 重复性试验精密称取丹酚酸B同一批号的样品5份，按 “2．2”项供试品溶液制备方法制备，按“2．1”项色谱条件测试， 测得丹酚酸B峰面积RSD％=O．6％(n=5)，结果表明本法的重复 性好。

 

2．8 加样回收率试验精密称取已知丹酚酸B含量的血栓心 脉宁胶囊样品共6份，分别精密加入丹酚酸B对照品，按供试 品溶液制备方法制备，依法测定，计算回收率，结果见表1。

 

2．9 样品的含量测定分别精密称取3批血栓心脉宁胶囊， 按供试品制备方法制备，精密吸取对照品溶液及供试品溶 液，注入GX液相色谱仪，按上述色谱条件测定丹酚酸B含 量，结果见表2。