人甲型H1N1抗体(IgM)ELISA试剂盒定量_详细资料

产品信息

人甲型H1N1抗体(IgM)ELISA试剂盒定量以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术，因其具有灵敏性高、特异性强、重复性好等优点，现已被广泛应用于科研实验中。。。。

人甲型H1N1抗体(IgM)elisa试剂盒定量说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：0.5 mU/L -22 mU/L
规格：48T/盒 96T/盒
选择要点
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中多巴胺 D2 受体抗体（D2R-Ab）活性。
注意事项
标本要求: 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作流程
1. 标准品的稀释：人甲型H1N1抗体(IgM)ELISA试剂盒定量提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6. 加酶：孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15 分钟.
10. 终止：孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
产品相册

计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1.人甲型H1N1抗体(IgM)ELISA试剂盒定量从冷环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在 5 分钟内，如标本数多，推荐使用排枪加样。 4．请次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含过高（样本 OD 值大于标准品孔孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期保存条件及有效期保存条件及有效期保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月
人葡萄糖调节蛋白78(GRP78)ELISA试剂盒定量
人几丁质酶3样蛋白1(YKL-40/CHI3L1)ELISA试剂盒定量
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人甲型H1N1抗体(IgM)ELISA试剂盒定量
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应用案例
人甲型H1N1抗体(IgM)ELISA试剂盒定量测定实验
试剂、试剂盒：Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液
仪器、耗材：微量滴定板分光光度计或酶联仪
材料与设备
牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液）Bradford 试剂（CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)分光光度计 (可在 595nm 处测量的) 或酶联仪 (带 595-nm 滤光片的)微量滴定板（ImmulonTM2，Dynatech Laboratories,Inc.)
试剂
Tris-缓冲盐溶液（TBS)(配方，见"试剂的配制" PP.184~189)
操作程序

1) 用 TBS 配制成一系列稀释度的 BSA 标准溶液，BSA 含量分別为：2000、1000、500、250、125、62.5 和 31.25ug/ml。每个待测的未知样品亦用 TBS 配制成一组倍比稀释的样品液。
2) 各取 5ul BSA 稀释液和未知样品稀释液，分别加入 1 ml Bradford 试剂。混合后，室温孵育 5 min, 并在 1 h 内测 A595nm 值。如有酶联仪可用，测 A595nm 值则更为方便。用微量滴定板法时，各样品取 7ul 加入 200ul Bradford 试剂中，用加样器吸头混合，并保证微孔中无气泡存在。若有气泡，则可用一 22 号针头将气泡刺破。室温下孵育 5 min 后，测定 A595nm 值。
3) 可测两种对照。—是测定存在于样品中的各种缓冲液，看看它们本身是否会显色。二是在有不同缓冲液存在的条件下测定中间浓度范围的 BSA 标准，看看这些缓冲液是否干扰 BSA 的显色。
4) 作标准曲线，确定未知样品的蛋白浓度。
注：由于σ32 纯化过程中所甩的-些试剂（如:SKL、脱氧胆酸钠和聚乙烯亚胺对本法有一定干扰，为此，我们找到了一种可以仿效的微量方法，即用 0、5、10、15 和 25ug/ml BSA 及 100、200 和 400 倍稀释的制备物样品进行测定。在微量滴定板各孔中，先加 100ul Bradfod 试剂，再分别加入各稀释样品 100ul, 然后按上述步骤搡作。

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