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人ELISA酶免试剂盒产品简介：

检测方法：酶联免疫法/酶免法（ELISA）

?抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水 性部分相互吸附，并保持其免疫学活性。

?抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学 和酶学活性。

ELISA洗涤一般可采用的方法有：

1.吸干孔内反应液；

2.将洗涤液注满板孔；

3.放置2min，略作摇动；

4.吸干孔内液，也可倾去液体后在吸水纸上拍干。洗涤的次数一般为3～4次，有时甚至需洗5～6次。

人ELISA酶免试剂盒保存条件及有效期：

1．试剂盒保存：2-8℃。

2．有效期：6个月

运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。

人ELISA试剂盒实验流程:

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；

2. 加样（标准品及样本）100μL，37°C孵育1小时；

3. 吸弃，加检测溶液A100μL，37°C孵育1小时；

4. 洗板3次；

5. 加检测溶液B100μL，37°C孵育30分钟；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育15－25分钟；

8. 加终止液50μL，立即450nm读数。

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人ELISA试剂盒操作步骤：

1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。 每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加 入50ul于反应孔内。

3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物 素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3 次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9）在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

1. 灵敏度：***小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

人ELISA酶免试剂盒四大特性：

1．特异性强：不与其它细胞因子反应。

2．重复性好：板内、板间变异系数均小于10%。

3．稳定性高：实验效果很稳定。

4．超灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品，稀释度和样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

人ELISA酶免试剂盒标本要求：

1、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2、不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

根据ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)所用的固相载体而区分为三大类型：一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)，即我们通常所指的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)（微量板ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)）；另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒),称为斑点ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)（Dot-ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)）;再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)，称为布ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)（C－ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)）。在微量板ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)中，又根据其性质不同分为间接ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、双抗体夹心ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、双夹心ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、竞争ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)、阻断ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)及抗体捕捉ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)。

“ELISA试剂盒"实验操作程序（具体请参照说明书）：

① 加抗体包被 → 4℃，洗涤三次、抛干

② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

④ 加底物液 → 37℃ 15分钟，加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值我公司拥有完善的售前、售中、售后服务，以及实验技术指导服务，欢迎您来电咨询上海酶远ELISA试剂盒，第二季度八五折优惠，可为您节省时间提供免费代测服务。

“人ELISA试剂盒"特点：① 准确度高，灵敏度高，特异性强；② 检测时间短；③ 操作简便；④ 安全可靠，欢迎咨询。

人ELISA试剂盒实验原理:

将转化生长因子β2 (TGFb2)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的转化生长因子β2 (TGFb2)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的转化生长因子β2 (TGFb2)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的转化生长因子β2 (TGFb2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算样品浓度。

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人ELISA酶免试剂盒选择要点：

 1. 选定一个检测范围内的浓度做多孔重复，可看出平行性好不好。即板内CV值的大小，此操作时需要小心加样的准确性。对一些制作较粗糙的试剂盒来说，

板间CV值是较大的。

 2. 可采用已知浓度的重组细胞因子，稀释到检测范围内作为样本加入，看检测的准确性。  

 3. 对用待测指标的重组细胞因子做试剂盒说明书上标定的Z小浓度稀释，可测出灵敏度，建议5个复孔以上才有意义。一般厂家以20个复孔做出的结果作为

检测限。用此实验可验证出所购试剂盒的灵敏度是否如说明书所述，也可判断出所购试剂盒是否有夸大之说。

 4. 如果有相同指标的进口试剂盒，可用对方的标准品作为样本，分别加入各自的试剂盒做检测，以检测试剂盒的真实性，准确性。如其中一种是知名的，比

较可靠的话，可作为标准来验证另一试剂盒的准确程度。

上海酶远“人ELISA试剂盒"的五大优点：

一、GX、灵敏、特异的抗体；

二、稳定的重复性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

五、限度的节省实验经费。

 我公司供应的酶联免疫试剂盒具有方便性，与国内其它生产商相比，检测抗体和HRP酶我公司产品中提供直接的稀释液，直接加样，免去了客户自己从高浓度向低浓度稀释；底物部分，上海酶远剂盒产品中配置进口单组分TMB，免去客户用双组分时用前的混合步骤。

    超方便的ELISA实验需要洁净的生产环境及科学的生产操控规程，保证每个品种不同批次产品质量的稳定性。 

上海酶远人elisa试剂盒供应商"优势：

1. 包被，采用国内精度Z好的包被机，板内误差和板间误差在5%之内；

2. 样本稀释液，我公司提供的样本稀释液可有效消除血清中某些成份的影响，准确度更高。

人ELISA试剂盒保存方法以及注意事项：

一、保存方法

    1.试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用。使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

    2.所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20℃。

二、注意事项

    1.温浴的时候要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。

    2.洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温6作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

    3.将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。       

三、样品保存方法

    如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。

不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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