T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ,重复性好,离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。
T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 ) 数量: 大量
保质期: 一年
保存条件: -20℃保存
规格: 150U
T4 RNA 连接酶 2 ,也被称为 T4 Rnl-2( gp24.1 ),同时具有 RNA 链分子间和分子内连接活性。与 T4 RNA 连接酶1不同的是,T4 RNA 连接酶2 对双链 RNA 切刻的连接活性要明显高于对单链 RNA 的末端连接。该酶连接时需要相邻的 3´ 羟基与 5´ 磷酸基。同时该酶也可用于连接双链结构中 RNA 3´ 羟基和 DNA 5´ 磷酸基的切刻 。它具有下列特点:1. 连接粘性末端接头2. 连接双链 RNA 中的切刻用酶3. 可用于 DNA/RNA 杂交链中,RNA 3'羟基与 DNA 5' 磷酸基的连接4. 无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
酵母与原核之间在重组蛋白的生产成本上的比较要看具体情况。T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )传统的酿酒酵母与大肠杆菌相比产量多数情况下处于劣势。但毕赤酵母高密发酵特性突出,表达量则常常超过大肠杆菌系统,如果实现GX分泌表达,则纯化成本非常低,具有生产成本优势。但毕赤酵母的胞内表达在纯化方面则不一定有优势。
T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )除了用于规模化生产重组蛋白之外,毕赤酵母还在基础研究方面发挥着重要 作用,比如表达蛋白用于结构分析,信号传导途径研究,当然也包括酶学研究。用酵母或原核系统对于活性未知的酶进行研究的例子少,一般酶活鉴定往往是用天然的蛋白解决的。
如果需要,完全可以利用毕赤酵母进行酶活性的探索,从以往的战绩来看,毕赤酵母表达表达成功的例子实在是太多了,T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )比例也很高,虽然仍存在风险。
1)原核诱导时间,从你的结果来看,诱导1-5小时变化不大,时间点影响较小,取3小时没有问题。很多情况下,温度对可溶性影响较大,不知道你30度诱导的可溶性如何?如果蛋白主要是可溶性的,那进一步降低诱导温度的意义也就小了。如果仍有较多的包含体,T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )倒是可以再降低一下诱导温度。此外,很多蛋白包含体复性后有活性,如果可溶性表达困难或表达量太低,仍可以考虑包含体复性策略。
2)酵母细胞的破壁可以采用机械法,也可以采用酶法。机械法主要是高压匀质和珠磨,主要用于中试和生产,但有的仪器也可以兼顾实验室规模,这两种方法效率较高。酶法主要用于制备球形体,是一种外源基因GX转化的方法,T4 RNA 连接酶 2 (双链RNA连接酶 )但用于破壁检测表达则成本太高,此外使用酶破壁也会引入杂蛋白。我查过一篇文献,是小量裂截用于表达检测的,我没有直接作过,但我们实验室的研究生反映还可以。
71206-50 柱式动物DNAout 50次
80923-4 大提柱式动物DNAout 4次
3671-50 血液DNAout 50次
3671-150 血液DNAout 150次
60306-50 柱式血液DNAout 50次
80924-4 大提柱式血液DNAout 4次
80920-1 96孔板血液DNAout 1次
80920-5 96孔板血液DNAout 5次
71002-30 凝固血液DNAout 30次
71002-100 凝固血液DNAout 100次
71204-50 柱式凝固血液DNAout 50次
80805-50 柱式毛发DNAout 50次
91102-50 柱式骨骼DNAout 50次