人抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)ELISA试剂盒供应厂家批发价格多少?上海酶远生物科技有限公司主营大鼠ELISA试剂盒,elisa试剂盒,进口elisa试剂盒,人elisa试剂盒,ELISA检测试剂盒,微生物培养基,血清,生物试剂,进口标准品对照品,抗体等科研试剂,欢迎您来电咨询。
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人ELISA试剂盒产品简介:
检测范围:来电咨询
样品形式:血清/血浆/细胞培养上清/其它生物液体(具体情况请咨询)
保存与运输:短期4℃/长期-20℃保存
应用范围:科研用检测试剂
人ELISA试剂盒试验原理:
ELISA检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。
人ELISA试剂盒操作步骤:
1,试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
2,实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3,不用的其它试剂应包装好或盖好。
4,使用一次性的吸头以免交叉污染,避免使用带金属部分的加样器。
5,使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6,洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
8,严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主。
本公司专业供应各Elisa试剂盒,其质量被全国各大院校科研机构认可,并指定为Elisa试剂盒长期供应商,作为战略合作伙伴。欢迎来电咨询订购!
人ELISA试剂盒注意事项:
1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人ELISA试剂盒说明:
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
人ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材:
1.标准规格酶标仪
2.高速离心机
3.电热恒温培养箱
4.干净的试管和Eppendof管
5.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,Z好用多通道移液器
6.蒸馏水,容量瓶等
人ELISA试剂盒实验原理:
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
目前ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。在动物检疫方面,ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。
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人ELISA试剂盒标本的采集及保存:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 xg离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
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人ELISA试剂盒产品优势:
上海酶远ELISA试剂盒免费代测、送货上门
运输条件:低温运输,用干冰或者冰袋低温运输。
您于我公司购买产品后有任何疑问,都可以打电话给我公司业务员,我们会为您安排解决。在为了节省您宝贵的时间,我们还提供免费代实验,只要你把样品邮寄给我们,我们会在5-7个工作日内完成,并且保证结果。如果您对我们的ELISA试剂盒感兴趣的话,您可通过QQ在线咨询、邮箱咨询、网站留言、电话拨打的方式与我们取得联系,我们将竭诚为您服务,祝您工作愉快!
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常见问题:
1. 问--客户用48T试剂盒,大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条,但是他想做两次,可封板膜只有一张,那如果用完了怎么办?可以用什么别的东西取代吗?
答--可以把封板膜剪掉,用多少剪多少也可以用封口膜替代。
2. 问--实验过程中温育是放在哪温育呢?
答--可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行,只要恒定温度为37度。
人ELISA试剂盒订购说明:
1. 明确检测何种蛋白;
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性Z好;
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;
4. 咨询上海酶远使用的抗体类型;
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。
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