LB平板培养基(LB-AMP平板)快速从不同材料中获得高质量的基因组DNA或总RNA ,重复性好,离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小。2. 节省时间、简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。3. 可配合RNase free DNase直接在离心吸附柱子RA上面消化DNA。
LB平板培养基(LB-AMP平板) 数量:大量
保质期:半年
保存条件:低温
规格:10块
LB平板培养基(LB-AMP平板)添加DMSO或者使用修饰化的碱基以及使用LA-Taq来扩增PCR这些在我也都做过,不过都正如你所说,都是直接扩增基因组或cDNA.
而高GC含量影响反转录也是肯定的,因为高GC肯定容易形成复杂的二级结构,这些可以参见《分子克隆》。“我至今没有听说高GC含量会不利于逆转录,有一个证据就是在FMDV基因组RNA中有长达500bp的GC tail,LB平板培养基(LB-AMP平板)这个病毒的全基因组一样被测序出来”,但这并不能说明逆转录没有遇到麻烦,人家不会告诉你经过怎样的过程才测出来的。比如,对高GC含量的模板测序会比较困难吧,可是你到网上搜一搜,高GC含量的区域多的是,不然的话我也不无法预测我的基因5‘端有一个高GC区了是吗?我们不能因此就推出GC含量高不影响测序吧?我自己的例子也证明了高GC含量影响逆转录的,因为无论是筛库还是RACE,都是只能拿到此区域的相邻3’区,而可以肯定的是,所得到的一定不是全长,可见肯定是由于逆转录不过去。在搜一下文献,可以得出我的结论的。所以我现在的困难在于反转录,而不是PCR。
LB平板培养基(LB-AMP平板)首先检查一下你的基因片断大小以及回收量(应该不是很大,所以回收的量很可能太少),太小的片断不容易连,如果是这样建议使用好的感受态,或增大回收的量。其次看一下你回收时所用的紫外,波长是否小于314nm,如果是建议使用314以上的,并且操作时间尽量减短。第三,建议将回收产物普通Taq加A,不需回收,再连一次。,检查一下感受态。还有,如果T-easy存放时间过长,建议使用新的。
难度不出很大。LB平板培养基(LB-AMP平板)如果诱变的位点在基因中间,你可以用一个突变引物先引入突变;然后用这个突变体做一侧的引物(大引物),与另一个引物一起,以野生型基因为模板扩增。我们用这种方法做出来多个突变体。
ZI605-1羊抗人IgM(μ链特异)0.5mlZOMANBIO
ZI605-2羊抗人IgM(μ链特异)1mlZOMANBIO
ZI606-1兔抗大鼠IgG0.5mlZOMANBIO
ZI606-2兔抗大鼠IgG1mlZOMANBIO
ZI607-1羊抗兔IgG0.5mlZOMANBIO
ZI607-2羊抗兔IgG2mlZOMANBIO
ZI607-3羊抗兔IgG1mlZOMANBIO
ZI608-1兔抗猪IgG0.5mlZOMANBIO
ZI608-2兔抗猪IgG1mlZOMANBIO
ZI609-1羊抗小鼠IgG0.5mlZOMANBIO
ZI609-2羊抗小鼠IgG1mlZOMANBIO
ZI609-3羊抗小鼠IgG2mlZOMANBIO
ZI610-1兔抗鸡IgG0.5mlZOMANBIO
ZI610-2兔抗鸡IgG1mlZOMANBIO
ZI611-1兔抗牛IgG0.5mlZOMANBIO