石蜡包埋组织DNAout

 数量：大量
保质期：一年
保存条件：常温保存(溶液C需要-20℃保存)
规格：30次

我准备按照你提供的基本程序尝试一次。石蜡包埋组织DNAOUT还需要问的问题是：

1.洗涤包含体，实际上就是洗涤细胞裂解液离心后的沉淀，对吗？我将沉淀-20度保存，应该没有什么影响吧？另外，我看到有的包含体洗涤液配方中含有PMSF，是蛋白酶YZ剂，它是否对目的蛋白有影响呢？

2.尿素洗涤包含体，洗涤上清和沉淀分别进行SDS-PAGE，得到一个收率和纯度的尿素浓度。石蜡包埋组织DNAOUT洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解沉淀的吗？但不溶的沉淀能跑SDS-PAGE吗？这个收率和纯度是指洗涤后溶液里面浸出的目的蛋白吗？

3.我表达的目的蛋白是分解底物释放无机磷酸盐的一种水解酶，不适合用含有磷酸盐的PBS溶液来洗涤和缓冲，而是用Tris-HCl来洗涤和缓冲的。那我用Tris-HCl来配8M尿素，对复性有影响吗？

不知道你能否提供相应的参考文献或者书目给我，我再仔细看看。

石蜡包埋组织DNAOUT技术回答：

1）包含体在-20度或-70度保存较好，包含体状态的蛋白稳定性好，一但复性成功，溶液状态的蛋白容易被降解。PMSF，是蛋白酶YZ剂，应该对目的蛋白影响不大。我原来做实验时一般不加PMSF，加与不加看你的蛋白的稳定性。

2）洗涤上清和沉淀是指用尿素洗涤细胞裂解产物离心后的沉淀，用tip挑一点沉淀后用1倍的loading buffer重悬，与其他样品一起煮后电泳。从洗涤上清和沉淀的电泳情况可以看出目的蛋白的损失情况和杂蛋白的去除情况，石蜡包埋组织DNAOUT选择一个合适的洗涤条件有时对纯化和得率很重要。

3）用Tris配尿素，OK! 

 RNA抽提试剂盒系列

产品编号产品名称市场价

组织细胞ＲＮＡ抽提

总RNA小量提取试剂盒：从5×106真核细胞或30mg组织中提取100ug总RNA

R6834-00Total RNA Kit I (5)

R6834-01Total RNA Kit I (50)

R6834-02Total RNA Kit I (200)

总RNA中量提取试剂盒：从1×108个细胞/200mg组织中提取1mg总RNA

R6664-00Total RNA Kit Midi Kit(2)

R6664-01Total RNA Kit Midi Kit(10)

R6664-02Total RNA Kit Midi Kit(25)

总RNA大量提取试剂盒：从5×108个细胞/1g组织中提取5mg总RNA

R6693-01Total RNA Kit Maxi Kit(5)

R6693-02Total RNA Kit Maxi Kit(20)

高纯ＲＮＡ抽提试剂盒

R6812-00HP Total RNA Kit(5)

R6812-01HP Total RNA Kit(50)

R6812-02HP Total RNA Kit(200)

磁珠RNA提取试剂盒：

M6930-01Mag-Bind Total RNA Kit(50)

M6930-02Mag-Bind Total RNA Kit(200)

微量RNA提取试剂盒：从微量细胞或组织中提取总RNA