GFP标记的小鼠子宫颈癌细胞,U14-GFP细胞

 细胞名称：U14-GFP GFP标记的小鼠子宫颈癌细胞
培养条件：DMEM +10% FBS
形　　态：贴壁；上皮细胞样
背　　景：U14细胞转染pEGFP-N1，稳定表达绿色荧光蛋白，可作为报告基因用于外源基因表达研究。

GFP标记的小鼠子宫颈癌细胞,U14-GFP细胞各种肿瘤细胞，说一点自己的看法：
1. 培养细胞前，可以看看细胞特点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2. 不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说 MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是特别慢，等的人心焦，BT474 就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了。
3. 对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。
4. 冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基。
5. 培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次。
6. 养细胞的教训：不能偷懒!
GFP标记的小鼠子宫颈癌细胞,U14-GFP细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。
1. 不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存。
2. 发现有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的 kit 定期检测一下。
3. 细胞房日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸。
4. 细胞的传代一定要规律，保持相同的 confluency 和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延。
5. 注意个人卫生。
养GFP标记的小鼠子宫颈癌细胞,U14-GFP细胞真的不难，Z关键几点：
1. 所有的东西使用Z好的，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏。
2. 动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因。
3. 有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措。
4. 要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，细胞房的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验。
5. 个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Z近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢。
6. 细胞房不能进去太多人，避免相互干扰。 

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