人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒价格实验原理试剂盒采用双抗体夹心法,使用了两种高特异性的抗体测定靶蛋白,以TMB作为显色剂,显色的强度与样本中靶蛋白的量成正比。
人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒价格实验原理试剂盒采用双抗体夹心法,使用了两种高特异性的抗体测定靶蛋白,以TMB作为显色剂,显色的强度与样本中靶蛋白的量成正比。
elisa实验前的准备
1仔细阅读说明书
2确定试剂盒在有效期内
3按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)
4标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存),尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存
5准备好所有实验额外所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等
6根据检测标本数量确定所需试剂的量
7按说明书将所用试剂平衡至室温,配制所需试剂
elisa试剂盒组成
[96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
ELISA酶标板(可拆卸) | MicroELISAPlate(Dismountable) | 8×12 / 8×6 | 4°C/-20°C |
冻干标准品 | Reference Standard | 2/1支 | 4C/-20°C |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶20mL/12mL | 4°C |
浓缩生物素化抗体 | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支120μL/70μL | 4째C/-20째C |
生物素化抗体稀释液 | BiotinylatedDetection Ab Diluent | 1瓶10mL/6mL | 4°C |
浓缩HRP酶结合物 | ConcentratedHRPConjugate | 1支120μL/70μL | 4°C(避光) |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶10mL/6mL | 4°C |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶30mL/16mL | 4°C |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶10mL/6mL | 4°C(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶10mL/mL | 4°C |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5/3张 | |
产品说明书 | Product Description | 1份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1份 | |
人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒价格的应用
1.免疫酶染色各种细胞内成分的定位。
2.研究抗酶抗体的合成。
3.显现微量的免疫沉淀反应。
4.定量检测体液中抗原或抗体成分。
elisa试剂盒检测程序
1.建立标准曲线:设标准孔8孔,每孔中各加入样品稀释液100ul,孔加标准品100ul,混匀后用加样器吸出100ul,移至第二孔。如此反复作对倍稀释至第六孔,,从第六孔中吸出100ul弃去。第七孔为空白对照,第八孔为零孔。
2.加样:待测品孔每孔各加入待测样品100ul混匀。
3. 将反应板充分混匀后粘上封板纸置37 oC 120分钟。
4. 洗板:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
5. 每孔(除零孔)加抗体工作液50ul,置37℃ 60分钟。
6. 洗板:操作同4。
7. 每孔(除零孔)加酶标抗体工作液100ul(两滴),将反应板置37 oC 60分钟。
8. 洗板:同前。
9.每孔加入底物液A、B各一滴,置37 oC避光反应15分钟。
10. 终止:每孔加入1滴终止液混匀。
11. 测定:在450nm处测吸光值。
人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒价格注意事项:
1.保存:ELISA试剂盒中各试剂请按说明书提示合理存放。
在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强
光中。所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染,否则可能会出现错误的结果。
2.酶标板:刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。暂时不用的板条应拆卸后放入备用铝箔袋,按推荐温度存放!
3.加样:加样或加试剂时,个孔与一个孔的加样时间间隔如果太大,将会导致不同的“预温育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。每次的加样时间Z好控制在10分钟内。推荐设置复孔。
4.温育:为防止样品蒸发,实验时必须给酶标板覆膜;洗板后应尽快进行下步操作,避免酶标板处于干燥状态;严格遵守给定的温育时间和温度。
5.洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在吸水纸上拍干,勿将滤纸直接放入反孔中吸水。在读数前要注意清除底部残留的液体和手指印,以免影响酶标仪读数。
6.试剂配制:运输过程会使液体沾到管壁或瓶盖,因此使用前1000转/分离心1min,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。取用前,请用移液器小心吹打4-5次使溶液混匀。标准品、生物素化抗体工作液、酶结合物工作液请根据所需用量配制,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请精确配制标准品及工作液,尽量不要微量配制以避免由于不准确稀释而造成浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素化抗体工作液、酶结合物工作液。若需要分次使用标准品应按照每一次用量分装,将其放在-20~-80°C贮存。避免反复冻融。
7.显色时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如每隔
5分钟),如梯度已很明显,请提前加入终止液终止反应,避免颜色过深影响酶标仪读数。
8.底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
9.混匀:充分轻微混匀对反应结果尤为重要,Z好使用微量振荡器(使用频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻敲击酶标板框混匀。
10.安全:试验中请穿着实验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。
11.不同批号的试剂盒组份不能混用(洗涤液和反应终止液除外)
12.试验中所用的EP管和吸头均为一次性使用,严禁混用,否则将影响试验结果!
elisa试剂盒操作概要
1.在各孔中加入标准品或样品各100μL,37°C孵育90分钟
2.倒去孔内液体,加入100μL 生物素化抗体工作液,37°C孵育60分钟
3.洗涤3次
4.加入100μL酶结合物工作液,37°C孵育30分钟
5.洗涤5次
6.加入90μL底物溶液,37°C孵育15分钟左右
7.加入50μL终止液,立即在450nm波长处测量OD值
8.结果计算
人白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒价格安全性
1)避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
关于我们
公司拥有高水平的博士技术研发团队,多名技术骨干具有国外学习经历或跨国生物公司工作背景,公司同时聘请南京大学、东南大学、ZG药科大学、南京中医药大学等高校ZD实验室学科带头肝纤维化检测担任公司技术顾问。
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