大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA检测试剂盒免费代测

大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA检测试剂盒免费代测

简介：

本试剂盒仅供研究使用

 检测范围：欢迎QQ或电话或邮箱索取原版说明书

检测限：欢迎QQ或电话或邮箱索取原版说明书

特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月

预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

说明：

1．试剂盒保存：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

操作步骤：

1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。

3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此

重复5次，拍干。

5、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

6、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

10 分钟.

7、终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

   公司所售【鼠ELISA试剂盒】请贮存于2-8℃，切勿冷冻，避免阳光直晒。未使用完的酶标板条应密封，2-8℃保存，具有方便、快速、灵敏等特点，因其性质稳定、使用方便、价格低廉、在科研领域用途比较广泛，本ELISA试剂盒有效期为12个月，生产日期见批号，实验显色深，含量少，显色浅，含量多，本试剂盒灵敏度请来电详询。

大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA检测试剂盒免费代测

用于检测未知抗体的间接法：
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
   ↓   
加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。（同时做空白、阴性及阳性孔对照）
   ↓   
于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml  ， 37℃孵育30-60分钟，洗涤,一遍用DDW洗涤。
 ↓  
加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。 
     ↓
终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
     ↓
结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性  

操作注意事项：

1.试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4.使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6.洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7.底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用8.手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

9.加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

10.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

实验原理：

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制：

1.酶联板(Assay plate )：一块(96孔)。

2.标准品(Standard)：2瓶(冻干品)。

3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent)：1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent)：1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体(Biotin-antibody)：1×120μl/瓶(1：100)

7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)：1×120μl/瓶(1：100)

8.底物溶液(TMB Substrate)：1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液(Wash Buffer)：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10.终止液(Stop Solution)：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

需要而未提供的试剂和器材：

1.标准规格酶标仪

2.高速离心机

3.电热恒温培养箱

4.干净的试管和Eppendof管

5.系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，Z好用多通道移液器

6.蒸馏水，容量瓶等

标本的采集及保存

1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本的稀释原则：

首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。

标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。

如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

生物素标记抗体的稀释原则：

临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：

临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

洗板方法：

手工洗板方法：吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

 计算：

以标准物的浓度为横坐标(对数坐标)，OD值为纵坐标(普通坐标)，在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

ELISA试剂盒 样本要求：

1、样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的YZ剂。

2、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

3、样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。

精密度：

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100

批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。

批内差： CV<10%

批间差： CV<12%

稳定性：

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。

为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程：

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；

2. 加样（标准品及样本）100μL，37°C孵育1小时；

3. 吸弃，加检测溶液A100μL，37°C孵育1小时；

4. 洗板3次；

5. 加检测溶液B100μL，37°C孵育30分钟；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育15－25分钟；

8. 加终止液50μL，立即450nm读数。

酶联免疫方法标本的采取和保存，可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。

上海酶远“鼠ELISA试剂盒"，享VIP 模式代测服务！

服务编号    服务项目    内容说明    提交结果    周期

RGSc1    间接法ELISA检测    客户提供检测材料    检测试验报告    1周

RGSc2    夹心法ELISA检测    客户提供检测材料和检测试剂盒    检测试验报告    1周

RGSc3    竞争法ELISA检测    客户提供检测材料和检测试剂盒    检测试验报告    2周

在寄ELISA试剂盒标本的同时，需要您注明：标本编号、所测项目、是否做复孔、联系方式、实验后标本是否寄回。

上海酶远鼠ELISA试剂盒免费代测、送货上门

运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。

    您于我公司购买产品后有任何疑问，都可以打电话给我公司业务员，我们会为您安排解决。在为了节省您宝贵的时间，我们还提供免费代实验，只要你把样品邮寄给我们，我们会在5-7个工作日内完成，并且保证结果。如果您对我们的ELISA试剂盒感兴趣的话，您可通过QQ在线咨询、邮箱咨询、网站留言、电话拨打的方式与我们取得联系，我们将竭诚为您服务，祝您工作愉快！

鼠ELISA试剂盒订购说明：

1、绝大部分产品备有现货，一般情况下都能订货当日发货。

2、部分非常用产品，需提前1－2日预订，海外期货则需要提前3-6周预订。

3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化，若有变动以订货当日价格为准。

4、每日订单截止时间为16点整，部分城市可到17点整，因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。

用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室温下稳定；反应产物易于显现；能商品化生产。目前应用较多的有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP应用Z广。

本司相关优质产品：

大鼠大内皮素(Big ET)ELISA检测试剂盒
大鼠雌激素(E)ELISA检测试剂盒
大鼠内皮素1(ET-1)ELISA检测试剂盒
大鼠迟现抗原(VLA)ELISA检测试剂盒
大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA检测试剂盒
大鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA检测试剂盒
大鼠降钙素(CT)ELISA检测试剂盒
大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA检测试剂盒
大鼠抵抗素(Resistin)ELISA检测试剂盒
大鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA检测试剂盒
大鼠脂联素(ADP)ELISA检测试剂盒
大鼠催乳素(PRL)ELISA检测试剂盒
大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA检测试剂盒
大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA检测试剂盒
大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA检测试剂盒
大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA检测试剂盒
大鼠醛固酮(ALD)ELISA检测试剂盒
大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA检测试剂盒
大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA检测试剂盒
大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA检测试剂盒
大鼠促卵泡素(FSH)ELISA检测试剂盒
大鼠雌二醇(E2)ELISA检测试剂盒
大鼠前列腺素F(PGF)ELISA检测试剂盒
大鼠雌二醇受体(ER)ELISA检测试剂盒
大鼠睾酮(T)ELISA检测试剂盒
大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA检测试剂盒
大鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA检测试剂盒
大鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA检测试剂盒
大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA检测试剂盒
大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA检测试剂盒
大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA检测试剂盒
大鼠雌三醇(E3)ELISA检测试剂盒
大鼠促黄体激素(LH)ELISA检测试剂盒
大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒
大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA检测试剂盒
大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA检测试剂盒
大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA检测试剂盒
大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA检测试剂盒
大鼠抗中性粒/ZX体抗体(ACA)ELISA检测试剂盒
大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA检测试剂盒
大鼠甲状腺素(T4)ELISA检测试剂盒
大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA检测试剂盒
大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA检测试剂盒
大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA检测试剂盒
大鼠复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA检测试剂盒
大鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA检测试剂盒
大鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA检测试剂盒
大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA检测试剂盒
大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA检测试剂盒
大鼠神经营养因子4(NT-4)ELISA检测试剂盒
大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA检测试剂盒
大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA检测试剂盒
大鼠胰岛素(INS)ELISA检测试剂盒
大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA检测试剂盒
大鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA检测试剂盒
大鼠C肽(C-Peptide)ELISA检测试剂盒
大鼠窖蛋白(Caveolin1 Cav-1)ELISA检测试剂盒
大鼠神经生长因子(NGF)ELISA检测试剂盒
大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA检测试剂盒
大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA检测试剂盒
大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA检测试剂盒
大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒
大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA检测试剂盒
大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA检测试剂盒
大鼠白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA检测试剂盒
大鼠活化素A(ACV-A)ELISA检测试剂盒
大鼠白介素4(IL-4)ELISA检测试剂盒
大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)ELISA检测试剂盒
大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA检测试剂盒
大鼠白介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒
大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA检测试剂盒
大鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA检测试剂盒
大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA检测试剂盒
大鼠纤连蛋白(FN)ELISA检测试剂盒
大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA检测试剂盒
大鼠白介素18(IL-18)ELISA检测试剂盒
大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA检测试剂盒
大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA检测试剂盒
大鼠白介素10(IL-10)ELISA检测试剂盒
大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA检测试剂盒
大鼠一氧化氮(NO)ELISA检测试剂盒
大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒
大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA检测试剂盒
大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA检测试剂盒
大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测试剂盒
大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA检测试剂盒
大鼠核因子κBYZ蛋白α(IKBα)ELISA检测试剂盒