| 产品名称： | 小鼠羟脯氨酸(Hyp) elisa试剂盒 |
| 有效期： | 六个月 |
| 保存与运输： | 2到8℃ |
| 应用范围： | 科研用检测试剂 |
| 供货商： | 上海信帆生物科技有限公司 |
上海信帆销售小鼠羟脯氨酸(Hyp) ELISA试剂盒，全程提供技术指导，提供售后服务。
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| 操作步骤 |
| 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 |
| 8 nmol/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液 |
| 4 nmol/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液 |
| 2 nmol/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液 |
| 1 nmol/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液 |
| 0.5 nmol/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液 |
| 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 |
| 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl， |
| 然后再加待测样品10μl（样品稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 |
| 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 |
| 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 |
| 4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用 |
| 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 |
| 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 |
| 7. 温育：操作同3。 |
| 8. 洗涤：操作同5。 |
| 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 |
| 10 分钟. |
| 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 |
| 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。 |
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| 操作程序总结： |
| 计算 |
| 以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 |
| OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标 |
| 准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数， |
| 即为样品的实际浓度。 |
| 注意事项 |
| 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 |
| 用完，板条应装入密封袋中保存。 |
| 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 |
| 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好 |
| 控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 |
| 4． 请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值 |
| 大于标准品孔孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计 |
| 算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。 |
| 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 |
| 6．底物请避光保存。 |
| 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. |
| 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 |
| 9．本试剂不同批号组分不得混用。 |
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